“G_1期造血幹細胞"の分泌する細胞増殖抑制因子の精製とその作用機序の解析

我々は、マウス骨髄中に、腫瘍細胞の増殖を抑制する細胞が存在することを見出した。その細胞の特徴を解析し、T細胞、B細胞、マクロファージ、NK細胞、NC細胞とは異なる新しい細胞で、(1)wheat germ agglutinin(WGA)に特異的に結合しやすい事(2)強力なCFUーS活性を有すること(3)5ーFUに感受性であることからcycling phaseの造血幹細胞群に属するものと考えられる(Proc.Natl.Acad.Sci.85:4824,1988)。この細胞は、DNA合成を非特異的に抑制するfactorを産生しており、限外ろ過装置(Amicon PMー10 filterを使用)で、約15倍に濃縮後、SephacrylSー200でゲルろ過を行うと、分子量20,000の所に、活性が認められた。このcycling phaseの造血幹細胞の腫瘍細胞増殖抑制能は、ILー3とGMーCSFによって増強されることが明らかになった(Cancer Research in press)。ヒトへの応用を目的に、まず、モンキーを用いて、この細胞をcharacterizeした。骨髄中よりT細胞、B細胞、マクロファージを除去するに従って、腫瘍細胞の増殖抑制活性が増強した。さらに、Percollの比重分画法により、分画すると低比重分画(Fr.2:1.0600<rho<1.0655)に一番高い活性が認められた。このFr.2の細胞はNK活性も強いが、Fr.2の細胞をNKに対するモノクローナル抗体と補体で処理すると、NK活性は消去するが、腫瘍細胞の増殖抑制活性は影響を受けないことが判明した。さらに、このFr.2をWGA^+とWGA^-に分画すると、WGA^+の分画に強力な活性が認められ、in vitroのCFUーGM、CFUーMixの活性と腫瘍細胞の増殖抑制活性が相関することから、モンキーでも、造血幹細胞分画に、抗腫瘍性を有する細胞が存在することが明らかになった(BLOOD in press)。更に、ILー3 receptor関連抗体を用いて解析した結果、NS細胞は、ILー3R^+/WGA^+に属することが判明した(submitted to BLOOD)。現在、ヒトの骨髄中より、同様の方法で抗腫瘍性細胞を分離精製中である。

我々は、マウス骨髄中に、腫瘍細胞の増殖を抑制する細胞が存在することを見出した。その細胞の特徴を解析し、T細胞、B細胞、マクロファージ、NK細胞、NC細胞とは異なる新しい細胞で、(1)wheat germ agglutinin(WGA)に特異的に結合しやすい事(2)強力なCFUーS活性を有すること(3)5ーFUに感受性であることからcycling phaseの造血幹細胞群に属するものと考えられる(Proc.Natl.Acad.Sci.85:4824,1988)。この細胞は、DNA合成を非特異的に抑制するfactorを産生しており、限外ろ過装置(Amicon PMー10 filterを使用)で、約15倍に濃縮後、SephacrylSー200でゲルろ過を行うと、分子量20,000の所に、活性が認められた。このcycling phaseの造血幹細胞の腫瘍細胞増殖抑制能は、ILー3とGMーCSFによって増強されることが明らかになった(Cancer Research in press)。ヒトへの応用を目的に、まず、モンキーを用いて、この細胞をcharacterizeした。骨髄中よりT細胞、B細胞、マクロファージを除去するに従って、腫瘍細胞の増殖抑制活性が増強した。さらに、Percollの比重分画法により、分画すると低比重分画(Fr.2:1.0600<rho<1.0655)に一番高い活性が認められた。このFr.2の細胞はNK活性も強いが、Fr.2の細胞をNKに対するモノクローナル抗体と補体で処理すると、NK活性は消去するが、腫瘍細胞の増殖抑制活性は影響を受けないことが判明した。さらに、このFr.2をWGA^+とWGA^-に分画すると、WGA^+の分画に強力な活性が認められ、in vitroのCFUーGM、CFUーMixの活性と腫瘍細胞の増殖抑制活性が相関することから、モンキーでも、造血幹細胞分画に、抗腫瘍性を有する細胞が存在することが明らかになった(BLOOD in press)。更に、ILー3 receptor関連抗体を用いて解析した結果、NS細胞は、ILー3R^+/WGA^+に属することが判明した(submitted to BLOOD)。現在、ヒトの骨髄中より、同様の方法で抗腫瘍性細胞を分離精製中である。