多能性造血幹細胞とストローマ細胞との間の主要組織適合抗原複合体拘束性の解析

多能造血干细胞与基质细胞之间主要组织相容性复合体限制分析

• 批准号: 10181225
• 负责人: 池原 進
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kansai Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10181225/
• 关键词: Pluripotent hemopoietic stem cell; Stromal cell; Major histocompatibility complex; CFU-S; Cobblestone colony; H-2 congenic mouse; MHC class IKO mouse

申請者らは、多能性造血幹細胞(P-stem)とstromal cellsとの間に主要組織適合抗原複合体(MHC)の拘束性が存在することを見い出した(Blood85:49,1997)。今回、MHCの拘束性をさらに詳細に解析し、次のような結果が得られた。まず、in vivoの実験では、多能性前駆細胞によって形成されるDay 12 CFU-Sの数はMHC不一致の宿主マウスにおいて有意に減少していたが、やや分化した前駆細胞によって形成されるDay 8 CFU-Sの数は有意な差を認めなかった。T細胞やNK細胞を抗体投与によって宿主マウスから除去してもこのDay 12 CFU-Sの数には影響が見られなかった。さらに、MHC(H-2)コンジェニックマウスを用いた実験において、H-2内のlocusではDとL locusに強い拘束性が認められた。次に、より詳細なMHCの拘束性を解析するために、in vitroの実験を行った。5-FU処理4日後の正常マウスから分離した造血幹細胞(HSC:Lin^-Sca-1^+)と胎児骨由来ストローマ細胞の共培養後に形成されるcobblestone colonyの数は、MHC不一致のストローマ細胞培養中ではMHCが一致の場合の20〜30%であった。一方、5-FU処理したMHC class Iノックアウト(KO)マウスから分離したHSCを正常マウスのストローマ細胞と共培養した場合は、MHCが一致の場合もMHO不一致の場合も同様のcobblestone colonyの形成が見られたが、colony数は少数であった。現在、MHC class I KOマウスのストローマ細胞と正常マウスのHSCの組み合わせで解析するとともに、H-2内のいずれのlocusがcolonyの形成に関与するかをH-2コンジェニックマウスを用いて解析中である。

The applicant's pluripotent hematopoietic stem cells (P-stem) and stromal cells are mainly tissue adapted antigen complex (MHC) binding and present (Blood85:49, 1997). Now, MHC's binding behavior is analyzed in detail, and the results are obtained. The number of CFU-S in the host cell with MHC discordance was intentionally reduced and differentiated before the formation of pluripotent cells on Day 12. T cells and NK cells are administered to the host and the number of CFU-S is removed on Day 12. MHC(H-2) is the most important part of H-2. Second, the detailed analysis of MHC binding, in vitro and implementation After 4 days of 5-FU treatment, normal stem cells (HSC:Lin^-Sca-1^+) were isolated and co-cultured with fetal stem cells. The number of cobblestone colonies formed after co-culture was 20 ~ 30% when MHC was inconsistent with MHC. In case of MHC class I, 5-FU treatment, separation of HSC cells, co-culture of HSC cells, MHC consistency, MHO inconsistency, coblestone colony formation, colony number, etc. Now, MHC class I KO cells and normal HSC assembly analysis, H-2 locus and colony formation, H-2 locus and colony analysis.

项目成果

Takeuchi K,Inaba M,---Ikehara S: "A new strategy for treatment of autoimmune diseases in chimeric resistant MRL/lpr mice." Blood. 91. 616-623 (1998)

Takeuchi K，Inaba M，---Ikehara S：“治疗嵌合抗性 MRL/lpr 小鼠自身免疫性疾病的新策略。”

Morita H,Sugiura K,---Ikehara S: "A strategy for organ allografts without using immunosippressants and irradiation." Proc.Natl.Acad.Sci.95. 6947-6952 (1998)

Morita H，Sugiura K，---Ikehara S：“一种不使用免疫抑制剂和辐射的同种异体器官移植策略。”