多能性造血幹細胞の血球初期分化-マウス,モンキー,ヒトでの解析-

点击翻译按钮获取中文摘要

申請者らは、in vivoにおいて多能性造血幹細胞(HSC)とストローマ細胞間に主要組織適合抗原複合体(MHC)拘束性が存在し、HSCが増殖するためにはMHCの一致したストローマ細胞が必要であることを見出した(Blood 89:49,1997)。このMHC拘束性を詳細に解析するためにin vitroのassay系を確立した。5-FU処理したマウスのHSC(Lin-Sca-1+)をMHC一致あるいは、不一致の胎児骨由来ストローマ細胞と共培養させたところ、形成されるcobblestone colonyの数は、MHC不一致ストローマ細胞培養中ではMHCが一致の場合の30〜50%であった。一方、HSCあるいはストローマ細胞のいずれか一方をMHC class Iノックアウトマウスから分離したものにすると、MHCが一致の場合もMHC不一致の場合も同程度のcobblestone colony形成がみられ、colony数は少数であった。また、共培養の系にHSCのMHC class Iに対するモノクローナル抗体(mAb)を加えると、cobblestone colonyの形成は著しく低下した。それに対して、ストローマ細胞のMHC class Iに対するmAbを加えると、cobblestone colonyの形成は亢進し、stem cell factor(SCF)、Flt3-ligand、basic fibloblast growth factorなどの造血因子の発現も亢進していた。これらの結果から、in vitroの系においてもHSCとストローマ細胞間にMHC拘束性が存在することが判明した(Manuscript in preparation)。一方、in vivoにおいて、申請者らは、骨髄細胞の移植を経門脈的に行うとtoleranceが誘導され易いということを報告した(Proc.Natl.Acad.Sci.USA95:6947、1998)が、その機序を解析し、donorのHSCとdonorのストローマ細胞が肝にtrapされ、その結果donorの造血が促進されることを見出した(Blood95:1862-1868、2000)。この方法をヒトに応用するため、現在モンキーを用いてBMTの新しい方法論を確立中であるが、予備実験で経門脈的な骨髄移植はlowdoseの放射線でもキメリズムが成立する優れた方法であることが判明している(Manuscript in preparation)。