Immunocytochemical analysis on localization of plant hormones in callus related to regeneration capaci

愈伤组织中植物激素定位与再生能力相关的免疫细胞化学分析

• 批准号: 63560002
• 负责人: YOSHIDA Kaoru
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 1990
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63560002/
• 关键词: Rice; Barley; Regeneration; Plant Hormone; Adventitious Shoot; Embryoid; Immunocytochemistry; Callus; 再分化能; 不定根; ジベレリン; サイトカイニン

To clear the relation between regeneration capacity and localization of plant hormones in callus, a culture system of adventitious shoot formation and embryogenesis from cell suspension of rice (Oryza sativa L.) was established and immunocytochemistry was applied.When rice callus was transferred onto a regeneration medium containing low level of kinetin and ABA, it differentiated embryoid in high rate. On the other hand, when it was transferred onto a medium containing high level of 1-(2-chloro-4-pyridyl)-3-phenylurea (a kind of cytokinin) instead of kinetin, it differentiated adventitious shoots in high rate. Then, it is clear that regeneration pathway can be controlled by culture conditions.To detect IAA and ABA localization, immunocytochemistry was applied to the rice culture system using anti-IAA or anti-ABA monoclonal antibody. Neither IAA nor ABA could be detected, because epitope sites considered to be broken by fixation treatment.

为明确植物激素在愈伤组织中的分布与再生能力的关系，建立了水稻悬浮细胞不定芽形成和胚胎发生的培养体系。将水稻愈伤组织转移到含有低水平激动素和ABA的再生培养基上，获得了较高的胚状体分化率。另一方面，将其转移到含有高浓度的1-(2-氯-4-吡啶)-3-苯基脲(一种细胞分裂素)而不是激动素的培养基上，可获得较高的不定芽分化率。为了检测IAA和ABA的定位，用抗IAA和抗ABA的单抗对水稻培养体系进行免疫细胞化学检测。既不能检测到IAA，也不能检测到ABA，因为被认为是固定处理破坏了表位。

项目成果

Fujii, S., K. Yoshida and G. Takeda: "Histological observations of rice culture during controlled regeneration." Japan. J. Breed. 41 (suppl. 1). (1991)

Fujii, S.、K. Yoshida 和 G. Takeda：“受控再生过程中水稻培养的组织学观察”。

藤井 省吾・吉田 薫・武田 元吉: "イネ再分化時の培養条件による分化経路の制御" 育種学雑誌. 40(別冊2). 56-57 (1990)

Shogo Fujii、Kaoru Yoshida 和 Motoyoshi Takeda：“水稻再分化过程中培养条件对分化途径的控制”，《育种科学》杂志 40（特刊 56-57）（1990 年）。

Yoshida, K.: "Effects of temperature on chromosome aberration in callus derived from barley root tip." Japan. J. Breed.38 (suppl. 2). 202-203 (1988)

Yoshida, K.：“温度对大麦根尖愈伤组织染色体畸变的影响。”

吉田 薫: "オオムギ種子根カルスの染色体変異に及ぼす培養温度の効果" 育種学雑誌. 38(別冊2). 202-203 (1988)

Kaoru Yoshida：“培养温度对大麦种子根愈伤组织染色体变异的影响”，《育种科学》杂志 38（特刊 202-203）（1988 年）。

藤井 省吾・吉田 薫・武田 元吉: "イネ培養細胞の分化制御と組織学的観察" 育種学雑誌. 41(別冊1). (1991)

Shogo Fujii、Kaoru Yoshida、Motoyoshi Takeda：“培养水稻细胞的分化控制和组织学观察”《育种科学杂志》41（特刊 1）（1991 年）。