魚類における産卵雌特異物質とビテロゲニンの挙動

鱼类产卵雌性特异性物质和卵黄蛋白原的行为

• 批准号: 01540607
• 负责人: 山上 健次郎
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Sophia University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01540607/
• 关键词: 魚卵; 卵形成; 卵膜; 卵黄; 産卵雌特異物質; ビテロゲニン

本課題のもとで行った研究は下記の1および2より成り、それぞれの結果を記す1産卵雌特異物質(SF物質)とビテロゲニン(Vg)の肝臓内合成:メダカより単離精製した両物質のそれぞれと特異的に反応する抗体を作製し、雄成魚肝臓切片および肝臓抽出液を用いて免疫組織化学法および免疫ブロット法によって、エストロゲン投与後の両物質の生成過程をしらべた。両物質はともに投与後8〜12時間後に検出され、以後時間を追ってほぼ平行して増加してゆくことがわかった。これにより、両物質の遺伝子はエストロゲンの作用で可成り短時間のうちに、しかも殆んど同時的に発現することが予想される。本研究の過程で、SF物質に特異的に反応する抗一卵膜糖タンパク質抗体と交叉反応をする複数の高分子タンパク質が新たに発見され、従来のSF物質との識別や精製を行うことになったので、肝臓からのSF物質やVgのmRNAの分離は未だ行っていない。2卵内のVgおよび卵黄タンパク質の発生に伴う変化:発生初期のメダカ胞(胞胚)卵黄リンタンパク質をポリアクリルアミドゲル電気泳動法によりしらべ、2種の高分子量タンパク質と2種の低分子量タンパク質を見出している。前2者(PP1およびPP2)はVgと似たアミノ酸組成を示し、免疫ブロット法により抗一メダカVg抗体と反応することがわかっている。後2者(PP3、84KDaおよびPP4、47KDa)はリン含量やアミノ酸組成から、メダカのフォスビチンと考えられる。PPー3とPP4はそれぞれ単離精製した。以上4種類のリンタンパク質は発生第1日目と第2日目の間に急速に脱リン酸され、タンパク質部分も分解される。この変化は30℃で孵卵すると受精後10時間目の胚で認められはじめ、酸性フォスファタ-ゼのほかにプロテア-ゼの関与が示唆されている。

The results of this study are as follows: 1. Synthesis of female-specific substance (SF substance) and virotoxin (Vg) in liver: Preparation of antibody against SF substance and virotoxin (Vg) in liver sections and liver extracts of adult male fish by immunohistochemical method; After 8 ~ 12 hours, the substance will be released, and the time will be increased. The effect of these substances can be realized in a short time and at the same time In the process of this study, SF substance-specific antibodies, anti-protein antibodies, cross-reactions, and a plurality of polymer proteins were identified and purified, and SF substance-specific mRNA was isolated. 2. In egg, the vitelline protein was changed during the development of vitelline protein. The vitelline protein was changed during the early stage of development. Two kinds of high molecular weight vitelline protein and two kinds of low molecular weight vitelline protein were found. The first two (PP1 and PP2) are anti-Vg antibodies and anti-Vg antibodies. The latter two (PP3, 84KDa and PP4, 47KDa) have the same acid composition as PP 3, 84 KDa. PP 3 and PP4 are refined. The above four kinds of separation and purification are produced on the first day and the second day, and the separation and purification are rapidly decomposed. The temperature of the embryo changes from 30℃ to 10 hours after fertilization.

项目成果

Yasumasu,S.,I.Iuchi and K.Yamagami: "Isolation and some properties of low choriolytic enzyme(LCE),a component of the hatching enzyme of the teleost,Oryzias latipes" Journal of Biochemistry. 105. 212-218 (1989)

Yasumasu,S.,I.Iuchi 和 K.Yamagami：“低绒毛膜溶解酶 (LCE) 的分离和一些特性，低绒毛膜溶解酶 (LCE) 是硬骨鱼 Oryzias latipes 孵化酶的一个组成部分”生物化学杂志。

Hamazaki,T.S.,Y.Nagahama,I.Iuchi and K.Yamagami: "A glycoprotein from the liver constitutes the inner layer of the egg envelope(zona pellucida interna)of the fish,Oryzias latipes" Developmental Biology. 133. 101-110 (1989)

Hamazaki，T.S.，Y.Nagahama，I.Iuchi 和 K.Yamagami：“来自肝脏的糖蛋白构成了鱼 Oryzias latipes 的卵膜（透明带内部）的内层”发育生物学。

浜崎辰夫・井内一郎・山上健次郎: "メダカの生物学(山上,嶋編)" 東京大学出版会, 300 (1990)

滨崎龙夫、井内一郎、山上健二郎：《青鳉生物学（山上、岛编辑）》东京大学出版社，300（1990）

安増茂樹・井内一郎・山上健次郎: "メダカの生物学(山上,嶋編)" 東京大学出版会, 300 (1990)

Shigeki Yasumasu、Ichiro Inouchi、Kenjiro Yamagami：“青鳉生物学（山上和岛编辑）”东京大学出版社，300（1990）

Murakami,M.,I.Iuchi and K.Yamagami: "Isolation of yolk phosphoproteins of medaka and in vitro and in vivo examinations of their degradation" Zoological Science. 6. 1158 (1989)

Murakami,M.,I.Iuchi 和 K.Yamagami：“青鳉卵黄磷蛋白的分离及其降解的体外和体内检查”动物学科学。