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癌化及び脱癌化に伴うゲルゾリンファミリ-の発現と消長

凝溶胶蛋白家族在癌化和脱癌过程中的表达和进化

基本信息

批准号：
02152032
负责人：
野々村禎昭
金额：
$ 0.96万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02152032/
关键词：
ゲルゾリン癌化脱癌化

项目摘要

本研究は当初計画よりいくつか進歩があった為,以下3つに分けて書く1)ゲルゾリンファミリ-精製法の進歩主としてプラズマゲルゾリンについて24時間内で精製出来る方法を開発した。試料を30〜50%飽和硫安分画後,透折,45mMNaCl,25mMトリスーHCl(pH8,0),1mMEGTAで平衡化したDEAE52カラムにかけ同液で良く洗う。次いで30mMNaCl,O,1mMEGTAに変え,次いでCaCl_22mMにかえると,ほゞ単一バンドでゲルゾリンが得られる。2)74KDアイソマ-の精製と存在様式ゲルゾリンアイソマ-に74KDのものがあることが牛の副腎髄質でわかり,これを精製し,抗体をつくり,組織別に存在を確かめたところ,中枢神経系,一部の内分泌器官,幹細胞由来の一部に存在することがわかった。これらはいずれも開口分泌を行う組織である。さらに酵素分解して,N端分画,C端分画に分けることが出来た。ゲルゾリンファミリ-のもつ,アクチンのCa存在下での切断,PIP_2によるアクチン結合からの解離の性質はN端側にあることがわかった。3)癌化及び脱癌化3T3/NIH細胞で,cHaーras癌遺伝子の導入による癌化細胞とその脱癌化細胞の二次元電気泳動像でのゲルゾリンファミリ-の存在様式を調べた。抗体染色を転写膜上で行うと正常及び癌化細胞ではアイソマ-は2個であったが,脱癌化細胞では3個になっていた。量的にはほとんど変化はなかった。74KDの新らしいゲルゾリンファミリ-が発見されたので,癌化,脱癌化細胞でも検討していきたい。

This study is contrary to the original plan, the following 3 points are proposed: 1) The main progress of the purification method is to develop the purification method within 24 hours. After the sample is saturated with 30 ~ 50% sulfur, it is dissolved in 45 mM NaCl,25mM HCl(pH8,0),1 mM EGTA and equilibrated with DEAE52. The second is 30mM NaCl,O, 1mM EGTA, and the third is CaCl_22mM. 2)74KD antibody-specific protein, 74KD antibodyこれらはいずれも开口分泌を行う组织である。The enzyme is decomposed, the N-terminal is divided, and the C-terminal is divided. In the presence of Ca, PIP_2 and PIP_2, the dissociation of Ca and PIP_2 occurs at the N-terminal. 3)The expression of cHa-ras oncogene in cancerous and decancerous 3T3/NIH cells was modulated by two-dimensional electrokinetic imaging of cancerous and decancerous cells. Antibody staining on the membrane of normal and cancerous cells, 2, 3 The amount of. 74KD's new technology needs to be developed in order to prevent cancer and de-cancer cells from developing.