癌化及び脱癌化に伴うゲルゾリンファミリ-の発現と消長

凝溶胶蛋白家族在癌化和脱癌过程中的表达和进化

• 批准号: 02152032
• 负责人: 野々村 禎昭
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02152032/
• 关键词: ゲルゾリン; 癌化; 脱癌化

本研究は当初計画よりいくつか進歩があった為,以下3つに分けて書く1)ゲルゾリンファミリ-精製法の進歩主としてプラズマゲルゾリンについて24時間内で精製出来る方法を開発した。試料を30〜50%飽和硫安分画後,透折,45mMNaCl,25mMトリスーHCl(pH8,0),1mMEGTAで平衡化したDEAE52カラムにかけ同液で良く洗う。次いで30mMNaCl,O,1mMEGTAに変え,次いでCaCl_22mMにかえると,ほゞ単一バンドでゲルゾリンが得られる。2)74KDアイソマ-の精製と存在様式ゲルゾリンアイソマ-に74KDのものがあることが牛の副腎髄質でわかり,これを精製し,抗体をつくり,組織別に存在を確かめたところ,中枢神経系,一部の内分泌器官,幹細胞由来の一部に存在することがわかった。これらはいずれも開口分泌を行う組織である。さらに酵素分解して,N端分画,C端分画に分けることが出来た。ゲルゾリンファミリ-のもつ,アクチンのCa存在下での切断,PIP_2によるアクチン結合からの解離の性質はN端側にあることがわかった。3)癌化及び脱癌化3T3/NIH細胞で,cHaーras癌遺伝子の導入による癌化細胞とその脱癌化細胞の二次元電気泳動像でのゲルゾリンファミリ-の存在様式を調べた。抗体染色を転写膜上で行うと正常及び癌化細胞ではアイソマ-は2個であったが,脱癌化細胞では3個になっていた。量的にはほとんど変化はなかった。74KDの新らしいゲルゾリンファミリ-が発見されたので,癌化,脱癌化細胞でも検討していきたい。

The purpose of this study is to improve the performance of the system in the following three parts: 1) improve the performance of the system within 24 hours after the implementation of the method. After drawing 30-50% of the raw material and thioampere, fold thoroughly, 45mm NaCl2, 25mm sodium chloride, HCl (pH8,0), 1mMEGTA balance, DEAE52, wash, wash with the same liquid. The 30mm Naclore OPM 1mm MEGTA hammer, the second CaCl _ 22mM, the second, the second, the second, 2) there is a formula for the expression of 74KD antigens, and there is an endocrine organ in the central nervous system. There is an endocrine organ in one of the tissues, and there is an endocrine organ in the central nervous system. There is an endocrine organ in one cell. There is an endocrine organ in one of the cells. We need to make sure that the opening is secreted by the organization. The enzyme is broken down, the N-end is divided, and the C-end is divided. Please tell me that the Ca has been cut off in the presence of the device, and that the PIP_2 will be removed in combination with the dissociation of sexual contact. 3) Cancer and decarcinization 3T3/NIH cell, cHa ras cancer cell, two-dimensional electrophoretogram, cell cycle, cell cycle and cell cycle. Antibody staining was performed on the membrane in 2 normal and cancerous cells, and 3 in decarcinized cells. The amount of money is not good enough to change the quantity. 74KD

项目成果

野々村 禎昭 小幡 邦彦 編: "新生理学大系 7巻 発生・分化の生理学" 医学書院(東京), 312 (1991)

野野村义明和小畑邦彦主编：《新生理学系统第7卷：发育和分化的生理学》Igaku Shoin（东京），312（1991）

H.Fujita Y.Nonomura: "A specific protein,P^<92> detected in flat revertants derived from NIH/3T3 transformed by human activated cHaras oncogene" Exp.Cell Res.186. 115-121 (1990)

H.Fujita Y.Nonomura：“在源自由人激活的cHaras癌基因转化的NIH/3T3的扁平回复体中检测到的一种特定蛋白质，P^<92>”Exp.Cell Res.186。

H.Kurokawa Y.Nonomura: "Simple and rapid purification of brevin" Biochim.Biophys.Res.Comm.168. 451-457 (1990)

H.Kurokawa Y.Nonomura：“简单快速地纯化短链蛋白”Biochim.Biophys.Res.Comm.168。

T.Sakurai Y.Nonomura: "Distribution of gelsolinーlike 74,000 Mol WT.Protein is Neural and Endocine Tissues" Neuroscience. 38. 743-756 (1990)

T.Sakurai Y.Nonomura：“凝溶胶蛋白样 74,000 Mol WT 蛋白质的分布是神经和内分泌组织”神经科学 38. 743-756 (1990)。