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心筋症モデル動物における心筋障碑の分子レベルでの追究

心肌病模型动物心肌损伤的分子水平研究

基本信息

批准号：
62624505
负责人：
野々村禎昭
金额：
$ 0.83万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

特発性心筋症は未だ患者数こそ少ないがその予後の悪いこと, 若年者にも発症することで問題視されつつある. 一方その発症機序を解明する為に適当な実験動物が必要であるが, 従来筋ジストロフィー症の実験動物として開発されたジストロフィーハムスターの心筋障碍が心筋症の心筋障碍と類似していることから注目されてきている. 筋ジストロフィー症に関してはこの2, 3年ハーバード大のKunKelによって遺伝子工学的手法を駆使して飛躍的進歩がなされた. 特に遺伝子上ジストロフィー発症連関mRNAを促え, そのcDNAをとり5′端より配列をきめつつある. 今連関DNA欠損が原因となって産物の欠損が発症の機作になっているとすれば同様な機作が心筋にも心筋症で生じていることが考えられる.本年は先ずKunKelの結果をもとにジストロフィー連関遺伝子DNA中エクソン相当部の20merをペプチド合成しシステインをつけ, サイログロブリンをS-S結合したもので抗体を作製した. 結果はウサギについて免疫したものはペプチドにもサイログロブリンにも反応したものでサイログロブリンで吸収した. ジストロフィー発症骨格筋も心筋症発症心筋も細胞膜に欠陥があると思われるので膜分画を行うことにした.心筋を蔗糖TKMでホモジエナイズしてマイクロゾーム分画をとり, 次いで不連結蔗糖癌度勾配によりF_1, F_2, F_3の3つの分画を得た. 小胞体に存在するカルセクエストリンをスティンズオール染色で染めるとF_1は小胞体を含まない表面膜, F_2はどちらも含むジャンクション膜, F_3は小胞体膜であることがわかった. そこでSDSPAGEの6〜10%ゲルに流し, ウエスタンブロットして上記抗体で抗体染色することを試みたた. 少なくとも分子量350Kダルトンに反応し, もっと高い分子量をもつ蛋白質と反応した. 今後心筋症動物で検討していきたい.

The number of patients with idiopathic cardiomyopathy is not divided into two groups. If the patient is young, the problem will be solved. The mechanism of development of a disease is necessary for the development of a disease. 2, 3 years ago, Kunkel developed a new technology to make great progress in electronic engineering. The gene sequence is linked to mRNA, cDNA and 5′-terminal sequence. The cause of DNA deficiency is related to the mechanism of DNA deficiency. This year, Kunkel's results showed that the 20-mer sequence of DNA fragments was selected from the 20-mer sequence of DNA fragments, and S-S binding was used to produce antibodies. As a result, it is difficult to prevent the spread of diseases. The heart disease is caused by the absence of a membrane. TKM is the best way to get the best results. F_1 contains the surface membrane of the microsome, F_2 contains the surface membrane of the microsome, F_3 contains the surface membrane of the microsome. 6 ~ 10% of the SDSPAGE was stained with antibodies. A small molecular weight of 350K, a small molecular weight 350K, a small molecular weight From now on, animals with heart disease will be investigated.