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正常およびスキンド単離内皮細胞を用いた血管弛緩物質の遊離機序に関する研究

正常和皮肤离体内皮细胞舒血管物质释放机制的研究

基本信息

批准号：
02807010
负责人：
伊藤猛雄
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ブタ冠状動脈から得た内皮を用いて、ディスパ-ゼ処理により単離内皮細胞を得る方法を確立し、内皮を除去したブタ冠状動脈平滑筋を用いてバイオアッセイ法を作製した。このバイオアッセイ法を用いて実験した結果、生理的条件下で内皮細胞は自発的に血管弛緩物質を遊離しまたエンドセリンー1やアセチルコリンはその遊離を促進することがわかった。ブタ冠状動脈から得た内皮細胞の還流液による血管の弛緩作用は、その内皮細胞にあらかじめインドメサシンを処理しておくことにより半分以下に減少し、またオキシヘモグロビンとの併用により完全に抑制された。またウサギ大動脈から得た内皮細胞の還流液による血管の弛緩作用は、その還流液をオキシヘモグロビンで処理することにより完全に消失した。このことより血管内皮細胞由来の血管弛緩物質の主要なものはブタ冠状動脈とウサギ大動脈で異なっており、前者ではそれがサイクロオキシゲナ-ゼの産生物質であり後者のそれは一酸化窒素およびその類似体であることが判明した。ラジオイムノアッセイ法を用いた実験で、ブタ冠状動脈から得た内皮細胞の還流液中にはプロスタサイクリンの代謝産物である6ーKetoーPGF_<1α>が存在し、その量がエンドセリンー1やアセチルコリンで増加することより、この内皮細胞からの血管弛緩物質はプロスタサイクリンである可能性が高いものと考えられた。また内皮存在下でのブタ冠状動脈を用いてエンドセリンー1によるcyclicーAMPとcyclicーGMP濃度変化について検討した。エンドセリンー1はcyclicーAMPとcyclicーGMPの濃度を増加しなかった。またプロスタサイクリンもcyclicーAMPとcyclicーGMPの濃度を増加しなかった。このことよりプロスタサイクリンは細胞内のcycliーAMPとcyclicーGMPに関係することなく血管を弛緩させることがわかった。

The method for obtaining endothelial cells from coronary artery tissues was established and the method for removing endothelial cells from coronary artery tissues was established. The results show that under physiological conditions, endothelial cells are free from vasopressin and promoted to free from vasopressin. The vasodilatation of endothelial cells in coronary artery was reduced by half or more, and the vasodilatation of endothelial cells was completely inhibited by half or more. The vasodilatation of endothelial cells in the aorta was completely eliminated. The main components of vasopressin derived from vascular endothelial cells were identified as coronary artery and aorta, while the former components were identified as acid-producing substances. The presence and quantity of the metabolite of the vasopressin in the coronary artery endothelial cells and the effluents of the endothelial cells are highly probable. In the presence of endothelial cells, the concentration of cyclic AMP and cyclic GMP in coronary arteries varies. The concentration of cyclic AMP and cyclic GMP increased. The concentration of cyclic AMP and cyclic GMP increased. The relationship between cycli AMP and GMP in cells is very slow.