Molekulare Analyse der Eisenassimilation in der einzelligen Grünalge Chlamydomonas reinhardtii

单细胞绿藻莱茵衣藻铁同化的分子分析

• 批准号: 5246258
• 负责人: Professor Dr. Thomas J. Buckhout, Ph.D.
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Biologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1994-12-31 至 2003-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5246258?language=en
• 关键词: Molekulare; Analyse; der; Eisenassimilation; einzelligen

Das Ziel ist die Aufklärung der Mechanismen, die an der regulierten Fe-Aufnahme in der Grünalge Chlamydomonas reinhardtii und in dikotylen Pflanzen beteiligt sind. Anhand unserer Ergebnisse konnte gezeigt werden, daß, genauso wie in dikotylen Pflanzen, die Fe-Reduktion in Chlamydomonas eine notwendige Voraussetzung für die Fe-Aufnahme ist. Desweiteren Scheint in Chlamydomonas zusätzlich zu einer Fe3+-Reduktase und einen Transporter eine kupferhaltige Oxidase an der Fe-Aufnahme beteiligt zu sein. Aufgrund dieser Reoxidation des Fe2+ zeigt der gesamte Mechanismus Ähnlichkeit zur Fe-Aufnahme in Saccharomyces und Vertebraten. In dikotylen Pflanzen existieren bislang keinerlei Hinweise auf die Beteiligung einer Ferroxidase an Fe-Aufnahme. In dem beantragten Projekt sollen die Arbeiten zur Klonierung des Oxidasegens auf Chlamydomonas fortgesetzt und die Bedeutung dieses Enzyms für die Fe-Aufnahme charakterisiert werden. Um weitere Komponenten des Fe-Aufnahmesystems zu identifizieren, wurden Änderungen in der Proteinexpression unter Fe-Mangel untersucht. Mittels zweidimensionaler Elektrophorese konnten 15 Plasmamembran- und 15 lösliche Proteine in Chlamydomonas identifiziert werden, die unter Fe-Mangel differentiell exprimiert sind. Diese Proteine sollen mittels MALDI-TOF-Massenspektrometrie analysiert und identifiziert werden. GFG. sollen unbekannte oder für die Fe-Aufnahme wichtige Gene durch den Einsatz von degenerierten Oligonukleoitiden kloniert werden.

Das Ziel is die Aufklärung der Mechanismen，die an der regulierten Fe-Aufnahme in der Grünalge Chlamydia reinhardtii und in dikotylen Pflanzen beteiligt sind.因此，我们的工作需要韦尔登，时间，一般情况下，如在Pflanzen中，在Chlamydeine中的Fe-Reduktion不是为了Fe-Aufnahme而进行的Voraussetzung。在Chlamydia zusätzlich zuiner Fe 3 +-Reduktase和einen Transporter eine kupferhaltige Oxidase中设计一个铁还原酶，并将其与铁还原酶结合。研究了酵母菌和脊椎动物中Fe ~（2+）的再氧化作用，探讨了Fe ~（2+）的再氧化机理。在第二阶段中，铁氧化物酶和铁蛋白酶的结合没有明显的差异。在该项目中，我们解决了衣原体氧化酶的克隆化问题，并将酶用于韦尔登。另外，铁-Aufnahmesystem的组成部分可用于鉴定，在铁-Mangel下的蛋白质表达中可进行进一步研究。在铁-锰凝胶鉴别仪下，可鉴别韦尔登中的15种血浆和15种蛋白质。用MALDI-TOF-质谱法对该蛋白质进行韦尔登分析鉴定。GFG sollen unkannte or der für die Fe-Aufnahme wichtige Gene durch den Einescent von degenerierten Oligonukleoitiden kloniert韦尔登.