腫瘍内浸潤T細胞レパトアの遺伝子と機能解析

瘤内浸润 T 细胞库的遗传和功能分析

• 批准号: 04152022
• 负责人: 谷口 克
• 金额: $ 2.69万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04152022/
• 关键词: inverse PCR; TCRレパトア; メラノーマ; TCR; lgキメラ

次に述ベる三つの成果を得ることができた。1.腫瘍内浸潤T細胞の受容体遺伝子定量法の確立:cDNAを環状にし、T細胞受容体定常部プライマーを用いて二段階PCR法を行うことによって。浸潤T細胞受容体遺伝子を均一に増幅することを可能にした。この方法の利点は(1)ほぼ100個のT細胞の浸潤があればこの方法で検出可能である。(2)これらのクローンから遺伝子配列を決定することが可能である。(3)受容体の使用頻度の測定が可能であるある。であり、腫瘍内浸潤T細胞レパトアの研究に貢献するものと思われた。2.メラノーマ・レパトアの解析:上述の方法で、メラノーマ浸潤レパトアの解析によってレパトアは著しく限定されていることが判明した。TCRα鎖は5種類しか検出できず、しかもVα3とVα42H11が全体の1/3と1/4を占めた。それらはいずれもJ塩基配列が異なることからスーパ抗原様の抗原の関与が考えられた。3.T細胞受容体分子の可溶性キメラ蛋白化:T細胞受容体と免疫グロブリン遺伝子をキメラ化し、これまで膜分子としてしか抽出できなかったT細胞受容体を可溶化分子として大量生産させることに成功した。遺伝子再構成を起こしているゲノムDNA遺伝子断片を分泌型免疫グロブリン定常部遺伝子と結合させ、L鎖のみを産生するJ558L骨髄腫にキメラ遺伝子を導入すると可溶性キメラ分子を産生した。

The second part of the article is about the achievements of three years. 1. Establishment of quantitative method for receptor gene of infiltrating T cells in tumor:cDNA loop analysis, T-cell receptor constant analysis and two-stage PCR Infiltrating T cell receptor gene The advantages of this method are (1) (2)This is the first time I've ever been able to decide on a child arrangement. (3)The frequency of use of the container can be measured. Infiltrating T cells in tumors contribute to the study of tumor metastasis. 2. The analysis of the problem: The above method is used to determine the problem. TCRα lock 5 kinds The two groups are arranged in different ways. The two groups are related to each other. 3. Soluble protein of T cell receptor molecule:T cell receptor and immune protein are successfully produced in large quantities. DNA fragment recombination, secretory immune response, binding of DNA fragment to DNA fragment, and production of soluble DNA fragment.

项目成果

Hideki HAYASHI: "Molecular cloning and characterization of the gene encoding mouse melanoma antigen by cDNA library transfection" J.Immunol.149. 1223-1229 (1992)

Hideki HAYASHI：“通过 cDNA 文库转染对编码小鼠黑色素瘤抗原的基因进行分子克隆和表征”J.Immunol.149。

Masahiko SUZUKI: "Expansion of murine T cells bearing a unique TCR β-chain in Friend virus-induced tumor in situ" J.Immunol. 148. 2968-2973 (1992)

Masahiko SUZUKI：“在 Friend 病毒诱导的原位肿瘤中携带独特 TCR β 链的鼠 T 细胞的扩增”J.Immunol。148. 2968-2973 (1992)

Toshihiro ITO: "Monoclonal antibody against murine T cell receptor Vα14 cross-reacts with human DC3-ε and detects disulfide-linked dimeric form" Intl.Immunol.3. 991-995 (1991)

Toshihiro ITO：“针对鼠 T 细胞受体 Vα14 的单克隆抗体与人 DC3-ε 发生交叉反应并检测二硫键连接的二聚体形式”Intl.Immunol.3 (1991)。

Tsuneyoshi INABA: "Double step and inverse polymerase chain reaction for sensitive detection and cloning of T cell receptor variable region sequences" Intl.Immunol.3. 1053-1057 (1991)

Tsuneyoshi Inaba：“用于 T 细胞受体可变区序列的灵敏检测和克隆的双步和反向聚合酶链反应”Intl.Immunol.3。