リガンド分子設計によるチューブリンの薬物認識機構の解析

通过配体分子设计分析微管蛋白药物识别机制

• 批准号: 05152041
• 负责人: 岩崎 成夫
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05152041/
• 关键词: チューブリン; 微小管機能制御物質; 分子認識; 分子設計; アザコンブレタスタチン; 新規抗がん剤

本研究では、チューブリン上のコルヒチン結合部位に作用する最小、最強のリガンドであるコンブレタスタチンA_4とビンブラスチン部位に結合する2種の環状ペプチド、フォモプシンとウスチロキシンをリードとし、夫々の薬剤結合部位における分子認識機構の解析および新規抗がん剤の設計を目指して以下の成果を得た。コンブレタスタチンA_4をリードとする化合物として、3,4,5-トリメトキシフェニル基と3-ヒドロキシ-4-メトキシフェニル基をアミド、アミン、エステル、エーテル結合で連結した化合物を合成し、細胞毒性およびチューブリン重合阻害活性を検定した。その中で、多種のN-アルキル置換のトリメトキシベンジルアニリン系化合物が高いチューブリン重合阻害活性を示し、これら化合物およびチューブリンには活性を示さなかった数種のアミド系化合物が1μM以下の濃度でHL-60,KB細胞の増殖を50%阻害した。現在、これら化合物の担がんマウスに対する抗腫瘍活性を検討中である。また、上記の、チューブリンに対して活性なN-置換ベンジルアニリン誘導体に光アフィニティー標識用官能基およびアフィニティークロマト用官能基の導入を試行している。フォモプシン、ウスチロキシンをリードとする化合物の設計では、最重要部分構造と考えられる13員環部分の全合成法を開発中であり、これに成功すれば各種誘導体の構築が可能となり、構造・活性の解明に役立つ。一方で、天然物としてウスチロキシン類では最も簡単なTyr-Val-Ile-Glyを基本単位とする環状ペプチド(ウスチロキシンD)が発見され、活性を有することから、この基本構造をもとに分子認識機構の解明と新規抗腫瘍剤の開発を行っている。

This study で は, チ ュ ー ブ リ ン on の コ ル ヒ チ ン combining site に role す る the smallest and most の リ ガ ン ド で あ る コ ン ブ レ タ ス タ チ ン A_4 と ビ ン ブ ラ ス チ に ン parts combine す る two の annular ペ プ チ ド, フ ォ モ プ シ ン と ウ ス チ ロ キ シ ン を リ ー ド と し, husband 々 の 薬 tonic combining site に お け る molecular understanding の solution The analysis of the および new regulations on the design of がん antibiotics を aims to <s:1> て the following <s:1> achievements を and た. コ ン ブ レ タ ス タ チ ン A_4 を リ ー ド と す る compound と し て, three, four, five - ト リ メ ト キ シ フ ェ ニ ル base と 3 - ヒ ド ロ キ シ - 4 - メ ト キ シ フ ェ ニ ル base を ア ミ ド, ア ミ ン, エ ス テ ル, エ ー テ ル combining で link し し を た compounds synthesis, cell toxicity お よ び チ ュ ー ブ リ ン reclosing resistance against active を 検 set し た . そ の で, multiple の N - ア ル キ ル replacement の ト リ メ ト キ シ ベ ン ジ ル ア ニ リ ン series compound high が い チ ュ ー ブ リ ン reclosing resistance against active を し, こ れ ら compound お よ び チ ュ ー ブ リ ン に を は activity in さ な か っ た several の ア ミ ド が series compounds 1 mu M で の concentration below the HL - 60, KB cells を 50% resistance against し の raised colonization Youdaoplaceholder0. Now, the <s:1> れら compound is found to have がん ウスに ウスに ウスに against する anti-swelling activity を検 である. ま た, written の, チ ュ ー ブ リ ン に し seaborne て active な N - replacement ベ ン ジ ル ア ニ リ ン inductor に light ア フ ィ ニ テ ィ ー mark in functionality, お よ び ア フ ィ ニ テ ィ ー ク ロ マ ト use of functionality の import を trial し て い る. フ ォ モ プ シ ン, ウ ス チ ロ キ シ ン を リ ー ド と す る compound の design で は, the most important part of tectonic と exam え ら れ る 13 member ring part in synthesis を open 発 の で あ り, こ れ に successful す れ ば induced body の build が possibilities と な り の interpret, tectonic activity made つ に service. Party で, natural と し て ウ ス チ ロ キ シ ン class で は most も Jane 単 な Tyr - Val - Ile - Gly を basic 単 a と す る annular ペ プ チ ド (ウ ス チ ロ キ シ ン D) が 発 see さ れ, active を す る こ と か ら, こ の basic construction を も と に molecular understanding institutions の interpret と new rules anti swollen sores tonic の open 発 を line っ て い る.

项目成果

Sawada T.et al.: "Identification of the frag ment photo affinity-labeled with azidodonsyl.rhizoxin as Met.363〜Lys-379 on β-tubulin" Biochem.Pharmacol.45. 1387-1394 (1993)

Sawada T.等人：“用叠氮基·根瘤菌素光亲和标记的片段在β-微管蛋白上的Met.363〜Lys-379的鉴定”Biochem.Pharmacol.45 1387-1394（1993）。

Sawada T.et al.: "A fluorescent probe and a photo affinity labeling reagents to study the binding site of maytansin and rhizoxin on tubulin" Bioconjugate Chemistry. 4. 284-289 (1993)

Sawada T.等人：“用于研究微管蛋白上美登素和根瘤菌素结合位点的荧光探针和光亲和标记试剂”生物共轭化学。

LiY.et al.: "Interaction of a marine toxin dolastatin 10 with porcine brain tubulin:Competitive in hibition of rhizoxin and phomopsin A binding." Chemico-Biol.Interaction.(印刷中).

LiY.et al.：“海洋毒素多拉司他汀 10 与猪脑微管蛋白的相互作用：对根瘤素和拟茎点菌素 A 结合的竞争性抑制。Chemico-Biol.Interaction。”（正在出版）。

Nakada M.et al: "The first total synthesis of the antitumoy macro lide rhizoxin" Tetrahedron Lett.34. 1039-1042 (1993)

Nakada M.等人：“抗肿瘤大环内酯根毒素的首次全合成”Tetrahedron Lett.34。

Shirai R.,et al.: "Synthesis and anti-tubulin a ctivity of aza-combretastatins" Bioorg.Med.Chem.Lett.4. 699-704 (1993)

Shirai R.,et al.：“aza-combretastatins 的合成和抗微管蛋白活性”Bioorg.Med.Chem.Lett.4。