アデノウイルス遺伝子と相互作用する宿主細胞因子

与腺病毒基因相互作用的宿主细胞因子

• 批准号: 05152045
• 负责人: 永田 恭介
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05152045/
• 关键词: アデノウイルス; 遺伝子複製; 遺伝子転写; 宿主細胞因子; 無細胞質

我々はモデルがんウイルスとしてアデノウイルスをとりあげ、その増殖過程のうち遺伝子の複製段階と細胞がん化に関連した初期遺伝子の転写段階に焦点をあて、分子レベルでそれらの機構を明らかにするとともに、これらの段階に関与する宿主細胞由来の因子群の性状と細胞内機能を明かにすることを目的として研究を遂行した。感染細胞内における真の複製鋳型はウイルスDNAとコアタンパク質の複合体である。この複合体を鋳型として、裸のゲノムの複製に必須な5種類のタンパク質因子の存在下に試験管内相補試験で複合体の複製に必要な因子を精製し、Template Activating Factor-l(TAF-l)と命名した。TAF-lは複製の開始反応を促進するとともに、DNA鎖の伸長反応に必須であった。その部分アミノ酸配列を決定し、cDNAをクローン化した。今後、cDNAの全塩基配列を決定し、機能ドメインの同定を行なう必要がある。初期遺伝子の転写にかかわる因子のうち、E4TF1はすでにcDNAのクローン化に成功しており、etsドメインとnotchドメインをそれぞれ含む2つのサブユニットから構成されていることが示されている。本研究での大腸菌で発現したそれらの変異体を用いた解析から、転写活性化機能をもつものはE4TF1を構成する2種のサブユニットの4量体であることが明かとなった。初期遺伝子の転写にかかわる別の因子であるE4TF3の活性はE1A遺伝子産物や他の分子との相互作用、あるいは自身の修飾によって調節される。本研究によりE4TF3に強く相互作用する分子の中にはそれ自身をリン酸化する酵素が含まれており、このリン酸化酵素による修飾がE4TF3の活性を調節している可能性が示された。E4TF1およびE4TF3についてはそれらの細胞内における活性調節機構、とくに修飾による機構について解析をすすめる必要がある。

We are studying the origin and intracellular functions of host cells in the context of the replication stage and the cellular transformation stage of the initial gene. Infected cells are replicated in the form of DNA complexes. The Template Activating Factor-l(TAF-l) is named for the five essential factors for the replication of the complex in the presence of complementary factors in the tube. TAF-l starts to replicate and expands. The sequence of DNA was determined. In the future, the complete sequence of cDNA is determined, and the function is determined. In the initial stage, the cDNA sequence was successfully transformed into a sequence of genes, and E4TF1 was successfully transformed into a sequence of genes, including a sequence of genes. In this study, E. coli was found to have two kinds of different types of organisms, including E4TF1, E4TF1 and E4TF1. E4TF3 activity is regulated by E1A gene products, other molecular interactions, and its own modifications. This study demonstrates the possibility that E4TF3 activity may be regulated by modifications in the enzyme itself that interact strongly with E4TF3 E4TF1 and E4TF3 are required to regulate the activity of intracellular cells and to modify them.

项目成果

Dongmm Ma: "Isolation of a cDNA encoding the largest subunit of TFIIA reveals functions similar to coactivators" Genes and Dev.7. 2246-2257 (1993)

Dongmm Ma：“编码 TFIIA 最大亚基的 cDNA 的分离揭示了与共激活因子类似的功能”Genes 和 Dev.7。

Akiyoshi Taniguchi: "A cell-type specific transcription enhancer of type 16 human papillomavirus(HPV-16)-P97 promoter is defined with HPV-associated cellular events in human epithelial cell lines" Virology. 195. 500-510 (1993)

Akiyoshi Taniguchi：“16 型人乳头瘤病毒 (HPV-16)-P97 启动子的细胞类型特异性转录增强子是通过人上皮细胞系中 HPV 相关的细胞事件来定义的”病毒学。

Jun-ichi Sawada: "Transcriptional activation through the tetrameric complex formation of E4TF1 subunits" EMBO J.(印刷中). (1994)

Jun-ichi Sawada：“通过 E4TF1 亚基的四聚体复合物形成进行转录激活”EMBO J.（出版中）。