アデノウイルスDNAの複製と転写を制御する因子TAF-Iの機能の解析

腺病毒DNA复制和转录控制因子TAF-I的功能分析

• 批准号: 08264211
• 负责人: 永田 恭介
• 金额: $ 6.21万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08264211/
• 关键词: アデノウイルス; ゲノム複製; 遺伝子転写; 無細胞系; クロマチン; 白血病; 宿主因子; がん

我々は初期遺伝子の転写や遺伝子複製の真の鋳型であるクロマチン様構造をとったアデノウイルス(Ad)DNAとウイルスコアタンパク質との複合体を鋳型として用いた無細胞複製系を確立し、新たにコア複合体状の遺伝子の複製に必須な宿主細胞因子TAF-Iを精製するとともに、そのcDNAをクローニングした。cDNAから予想されるアミノ酸配列からTAF-Iが急性骨髄性白血病に関連した染色体転座の領域に存在しCAN遺伝子と融合するSET遺伝子産物と同一であることが示された。TAF-Iはコア複合体からの複製のみならず転写をも活性化することが見いだされた。本研究では、TAF-Iの転写活性化に関与する機能構造を決定するとともに、クロマチン様構造をとった鋳型からの転写活性化メカニズムを明らかにした。無細胞転写系を用いた解析から、TAF-Iは特異的なDNA上の配列に結合して複製や転写を活性化するのではなく、特異的な複製や転写因子がその結合部位にアクセスできるようにクロマチン構造を変化させる(クロマチンリモデリング)ことで抑制状態の遺伝子を活性化する機能をもっていることが示された。また、転写活性化にはC末端側に存在する高酸性領域とその直前の領域が必要であることが明かとなった。さらに、構造的に相同性の高いNAP-IがTAF-I活性を、逆にTAF-IがNAP-I活性を持っていることも示された。一方、細胞内生理機能を知る手掛かりとしてTAF-Iの発現特異性を新たに作製した抗TAF-I抗体を用いて調べた。その結果、TAF-Iは酵母を含む調べたかぎりすべての細胞に存在することが明らかとなった。本研究の成果は新たな発がん機構を理解するための基盤であるとともに、クロマチン状遺伝子の転写や複製の制御機構研究分野にも新たな視点を提供した。

In our early stage, we need to make a copy of the real copy of the cell. We need to have the host cell factor TAF-I, the cell copy of the cell, the cell. I don't know if I have a problem with cDNA. CDNA envisions that there is a domain of CAN fusion and SET fusion in the field of acid alignment, TAF-I, acute osteoblastic leukemia, acute osteoblastic leukemia, acute bone leukemia, bone marrow, bone marrow, bone, bone, TAF-I, copy, copy, write, activate, activate, copy, copy. In this study, the system, the TAF-I system, and the machine can determine whether and how to improve the performance of the system. The cell writing system is based on the analysis of the data, the combination of the DNA configuration of the TAF-I feature and the replication of the activation module. The copy write factor of the special device is used in the combination part of the system. The system is used to suppress the status of the device. It is necessary to make sure that there is a high-acid field and a straight-forward field in the C-terminal area of writing. The homogeneity, the high NAP-I TAF-I activity, the inverse TAF-I NAP-I activity, the high homogeneity, the high NAP-I activity, the inverse NAP-I activity, the high homogeneity, the high NAP-I activity and the reverse activity. On the other hand, the intracellular physiological mechanism can know that it is necessary to detect the specific TAF-I antibody and use the anti-TAF-I antibody. The results showed that there was a significant difference in the number of cells in TAF-I yeast. The results of this study are as follows: in the results of this study, the results of this study are as follows: the results of this study are as follows: the results of this study.

项目成果

永田恭介: "積み木細工の生物学" 共立出版, 203 (1996)

永田恭介：《积木生物学》Kyoritsu Shuppan，203 (1996)

永田恭介: "ウイルスの生物学-セントラルドグマ-" 羊土社, 189 (1996)

永田恭介：《病毒生物学 - 中心法则》Yodosha，189（1996）

Kenich Niikura: "Quantitative detection of protein binding onto DNA by using a Quartz-crystal microbalance" chemistry Letter. 863-864 (1996)

Kenich Niikura：“使用石英晶体微天平定量检测与 DNA 结合的蛋白质”化学快报。

Hiroyuki.Kawase: "NAP-I is a functional homologue of TAF-I that is required for replication and transcription of the adenovirus geneme in a chiomatin-like stracfure" Genes to Cells. 1(印刷中). (1996)

Hiroyuki.Kawase：“NAP-I 是 TAF-I 的功能同源物，是腺病毒基因在 Chiomatin 样结构中复制和转录所必需的”Genes to Cells 1（出版中）。