アデノウイルス遺伝子の宿主由来複製・転写因子TAF-Iの構造と生理機能

TAF-I（腺病毒基因的宿主复制和转录因子）的结构和生理功能

• 批准号: 07272216
• 负责人: 永田 恭介
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07272216/
• 关键词: アデノウイルス; 発がん; 転写; 複製; クロマチン構造; がん遺伝子; 無細胞系; 染色体転座

従来のアデノウイルス(Ad)遺伝子の複製・転写研究は他の遺伝子についての研究と同様に裸のDNAを鋳型として用いて行なわれてきた。しかし、AdDNAは粒子中ではウイルスコアタンパク質と複合体(Adコア複合体)を形成してクロマチン様構造をとっており、感染細胞内においても初期遺伝子の転写や遺伝子複製の真の鋳型はこのコア複合体と考えられている。そこで、このコア複合体を調製し、鋳型として用いて、新たに無細胞複製系を確立した。その結果、コア複合体状の遺伝子の複製には裸の遺伝子の複製に必須であった因子に加えて新たに同定した宿主細胞の因子、TAF-I(Template Acivating Factor-I)が必要であった。TAF-Iの部分アミノ酸配列を決定し、この情報をもとにcDNAをクローニングした。塩基配列を決定したところ、TAF-Iはある種の急性骨髄性白血病に付随した染色体転座領域に存在する遺伝子、setの産物であることが示された。クローン化されたcDNAより作製した野生型および各種欠損型組換え体TAF-Iを用いた解析から、複製系におけるTAF-I活性にはC末側の長い酸性アミノ酸領域が必須であることが明かとなった。また、TAF-Iはコア複合体からのウイルス初期遺伝子の転写を活性化した。組換え体TAF-Iを用いて作製した抗体を用い、TAF-Iが進化的に保存されたタンパク質であることを明かにした。

従 to の ア デ ノ ウ イ ル ス (Ad) posthumous son 伝 の copy, planning study は his の heritage 伝 son に つ い て と の research with others に の naked DNA を type where と し て in い て line な わ れ て き た. し か し, AdDNA は particles in で は ウ イ ル ス コ ア タ ン パ ク qualitative と complex (Ad コ ア complex) を form し て ク ロ マ チ ン others in tectonic を と っ て お り, infection cell に お い て も early heritage 伝 son の planning write や heritage 伝 son copy の is の type where は こ の コ ア complex と exam え ら れ て い る. そ こ で, こ の コ ア complex を し modulation type, where と し て in い て, new た に cell free copy is を establish し た. そ の results, コ ア complex shape の heritage 伝 son の copy に は naked の heritage 伝 son の copy に must で あ っ た Factor に plus え て new た に with fixed し た の Factor, host cells TAF -i (Template Acivating Factor - I) が necessary で あ っ た. TAF -i の part ア ミ ノ acid with を decided し, こ の intelligence を も と に cDNA を ク ロ ー ニ ン グ し た. Salt base with column を decided し た と こ ろ, TAF -i は あ る kind of acute leukaemia of sex of bone marrow の に pay with し た chromosome planning a field exist に す る heritage 伝, set product の で あ る こ と が shown さ れ た. ク ロ ー ン change さ れ た cDNA よ り cropping し た wild-type お よ び various owe damage type group in え body TAF -i を with い た parsing か ら, copy に お け る TAF -i active に は C at the end of the long side の い acid ア ミ ノ が acid field must で あ る こ と が Ming か と な っ た. ま た, TAF -i は コ ア complex か ら の ウ イ ル ス early heritage 伝 son の planning write を activeness し た. Group in え body TAF -i を with い て cropping し た antibody を い, TAF -i が evolutionary に save さ れ た タ ン パ ク qualitative で あ る こ と を Ming か に し た.

项目成果

永田恭介: "ウイルスの生物学-セントラルドグマ-" 羊土社, 189 (1996)

永田恭介：《病毒生物学 - 中心法则》Yodosha，189（1996）

小林信之: "ウイルス実験プロトコール" メジカルビュー社, 360 (1995)

小林伸行：《病毒实验方案》Medical View Publishing，360（1995）

Nagata, K.: "Replication factor encoded by a pututive oncogene, set, associated with myeloid leukomogenesis" Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 92. 4279-4283 (1995)

Nagata，K.：“由假定的癌基因编码的复制因子，与骨髓性白血病发生相关”Proc。

Matsumoto, K.: "Stimulation of DNA transcription from the adenovirus genome in a chromatin-like structure" J. Biol. Chem.270. 9645-9650 (1995)

Matsumoto, K.：“在染色质样结构中刺激腺病毒基因组的 DNA 转录”J. Biol。