哺乳類初期胚におけるP34^<cdc2>蛋白質リン酸化酵素活性の調節機構について

早期哺乳动物胚胎中P34^<cdc2>蛋白激酶活性的调控机制

• 批准号: 05760208
• 负责人: 青木 不学
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05760208/
• 关键词: 初期胚; 初期発生; チロシン脱燐酸化酵素; アンチセンスDNA

昨年度までの研究により、マウス初期胚においてmRNAレベルで多量に発現しているチロシン脱燐酸化酵素(protein tyrosine phospatase,PTP)として、T-cell PTP(TPTP)を同定した。本年度は、TPTPの抗体を作製し、その蛋白質レベルでの発現量の変化を初期胚において調べた。さらに、アンチセンスDNAを培養液に加えて胚に取り込ませ、TPTPの発現を止めることにより、その初期発生における役割を明らかにすることを試みた。まず、TPTPのN末端側のアミノ酸配列に対する抗体を作製し、免疫組織学的手法により、初期胚でのTPTP蛋白質の発現を調べた。TPTPは未受精卵においては、原形質膜上に検出できた。さらに、受精後、1細胞から2細胞期にかけては細胞質全体に多量に発現していた。そして、桑実胚から胚盤胞期にかけて、再び原形質膜上に局在した。次に、アンチセンスDNAを桑実胚期より培養液に加えたところ、胚盤胞期の胚ではTPTP蛋白質量が著しく減少していた。この時、胚盤胞への発生率にはまったく影響が見られなっかったが、細胞数が有為に増加していた。以上により、TPTPはマウスの初期胚において、発現パターンに変化があること、さらに、分裂に対して抑制的な機能を持つことが明らかとなった。

In the past year, the expression of protein tyrosine phosphopatase (PTP) and T-cell PTP(TPTP) in the early stage of embryonic development was determined. This year, the production of TPTP antibodies and the initial development of protein metabolism were regulated. In addition to the culture medium, the TPTP production process was also investigated. The expression of TPTP protein was modulated by immunohistochemical methods and antibody production in the N-terminal region of TPTP. TPTP is found in unfertilized eggs and on the protoplasmic plasma membrane. After fertilization, 1-cell stage, 2-cell stage, all cytoplasm is present in large quantities. The embryo stage of mulberry is in the embryo stage, and the protoplast is in the embryo stage. The amount of TPTP protein in the embryo stage of the embryo was increased and decreased. The growth rate of blastoderm cells was affected by the increase of cell number. The above, TPTP, its initial embryo, discovery, transformation, separation, suppression, function, maintenance, and maintenance

项目成果

Sobajma,T.,Aoki,F.,Kohmoto,K.: "Activation of mitogen-activated protein kinase during meiotic maturation in mouse oocytes" Journal of Reproduction and Fertility. 97. 389-394 (1993)

Sobajma,T.、Aoki,F.、Kohmoto,K.：“小鼠卵母细胞减数分裂成熟过程中丝裂原活化蛋白激酶的激活”《生殖与生育杂志》。