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真核細胞DNAプライマーゼ複合体の構造と機能に関する分子遺伝学的研究

真核生物DNA引物酶复合物结构和功能的分子遗传学研究

基本信息

批准号：
05772008
负责人：
浴俊彦
金额：
$ 0.7万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05772008/
关键词：
DNAプライマーゼ cDNA 複製関連酵素染色体マッピング

项目摘要

DNAプライマーゼは、原核細胞から真核細胞にいたるまでDNA複合開始に必須な酵素である。本研究においては、ヒトDNAプライマーゼを構成する46kDa、54kDaサブユニットをコードするcDNAクローンの一次構造の解析、ゲノミック遺伝子の解析を通じて、DNAプライマーゼに関する分子生物学的知見を得ることを目的とした。その結果、以下のことが明らかにされた。1 ヒトDNAプライマーゼを構成する46kDa、54kDaサブユニットをコードするcDNAクローンをlambdagt10ライブラリーより単離し、全一次構造を決定した。46kDaサブユニットについては420アミノ酸残基の、また54kDaサブユニットについては505アミノ酸残基から成るopen reading frameを得た。2 一次構造について酵母、マウス、ヒトで比較した結果、両サブユニットについて5カ所づつの保存されたドメイン(金属結合モチーフ等を含む)が見いだされた。また糖鎖付加部位については46kDa、54kDaサブユニットにつき2カ所、1カ所の存在が示唆された。3 ノーザン法により46kDaサブユニットについては2.7kbと1.4kbの、また54kDaサブユニットについては2.4kbの長さの転写産物が検出された。4 ESTプライマーと雑種細胞DNAパネルとを用いたPCR解析、また各々の遺伝子を含むコスミドクローンを用いた蛍光in situ hybridization法によって遺伝子の染色体マッピングを行った結果、46kDaサブユニット遺伝子については1番染色体テロメアに、54kDaサブユニット遺伝子については、3番と6番(短腕セントロメア近傍)染色体に座乗していることが明らかにされた。5 発現ベクターを利用した両蛋白質の大量調製、また各遺伝子につき5'上流領域を含むエキソン・イントロン構造の解析を現在行っている。

DNA, eukaryotic, eukaryotic and eukaryotic. In this study, the knowledge of 46kDa, 54kDa, cDNA, DNA, DNA, and molecular biology were analyzed. The results show that the following information is clear and accurate. 1. DNA, 54kDa, cDNA, cDNA, lambdagt10, quarantine, make a decision all at once. 46kDa, 54kDa, acid residues, acid residues. 2 to make the results of the yeast, the yeast and so on. There is an indication of instigation in the place where the sugar is paid, such as 46kDa, 54kDa, and so on. 3. Please tell me how to 46kDa the 1.4kb, 54kDa the 1.4kb, the 54kDa, the 2.4kb, the writing, the writing. 4. The PCR analysis of the cell DNA of the 4-year-old cell, the analysis of the PCR of each cell, the analysis of the data in each cell, the analysis of the results of the in situ hybridization method, the analysis of the results, the results of the chromosome analysis, the results of the in situ hybridization method, the results, and the results. Three times (short wrist, short wrist. 5. To analyze the current situation in the high-level field, which is based on the use of a large number of eggs in the upper-class field.