リピドアンカー法による膜結合タンパク質の設計と合成
リピドアンカー法による膜結合タンパク質の設計と合成
批准号:
05780422
负责人:
浜地 格
金额:
$0.58万
依托单位:
依托单位国家:
日本
项目类别:
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份:
1993
资助国家:
日本
项目状态:
已结题
起止时间:
1993 至 --
中文摘要
膜結合性タンパク質は生体膜中に特定の配向で固定化され多彩な生体機能を発揮していることが知られている。本研究では完全な膜貫通型タンパク質の開発をめざして水溶性のタンパク質の特定の位置を疎水性長鎖(アンカー)で修飾したリピドアンカー蛋白を分子設計、合成し、次いで二分子膜中への配向固定化に必要な条件を検討を行い、人工膜蛋白質の設計のためのリピドアンカー法の開発を目的とした。本年度はアンカー長鎖の導入法として、補欠分子団のアポ蛋白質との再構成が有用であることがミオグロビンを用いて明らかにされた。この手法によって種々の長鎖アルキル基をミオグロビンの活性中心近傍に特異的に導入することが可能となった。得られたアンカーミオグロビンの膜結合能を限外濾過、ゲルカラム、膜結合色素の消光実験などから評価すると、いくつかのオキシエチレン鎖をスベーサーとして持つ長鎖アルキル基(炭素数12から8)が最も強い膜結合性を示した。また膜結合したタンパク質の分子配向を固定化二分子膜の磁気異方性から求めると、十分な疎水性長鎖を持つ場合にはタンパク質の膜面に対する分子配向が揃うのに対して、親水性のアンカー鎖ではタンパク質の規則配向は得られなかった。これらの知見は本来水溶性のタンパク質を膜結合性に変換するために、適切に設計された疎水性長鎖の位置特異的な導入がきわめて有効であることを明瞭に示すものである。
英文摘要
膜結合性タンパク質は生体膜中に特定の配向で固定化され多彩な生体機能を発揮していることが知られている。本研究では完全な膜貫通型タンパク質の開発をめざして水溶性のタンパク質の特定の位置を疎水性長鎖(アンカー)で修飾したリピドアンカー蛋白を分子設計、合成し、次いで二分子膜中への配向固定化に必要な条件を検討を行い、人工膜蛋白質の設計のためのリピドアンカー法の開発を目的とした。本年度はアンカー長鎖の導入法として、補欠分子団のアポ蛋白質との再構成が有用であることがミオグロビンを用いて明らかにされた。この手法によって種々の長鎖アルキル基をミオグロビンの活性中心近傍に特異的に導入することが可能となった。得られたアンカーミオグロビンの膜結合能を限外濾過、ゲルカラム、膜結合色素の消光実験などから評価すると、いくつかのオキシエチレン鎖をスベーサーとして持つ長鎖アルキル基(炭素数12から8)が最も強い膜結合性を示した。また膜結合したタンパク質の分子配向を固定化二分子膜の磁気異方性から求めると、十分な疎水性長鎖を持つ場合にはタンパク質の膜面に対する分子配向が揃うのに対して、親水性のアンカー鎖ではタンパク質の規則配向は得られなかった。これらの知見は本来水溶性のタンパク質を膜結合性に変換するために、適切に設計された疎水性長鎖の位置特異的な導入がきわめて有効であることを明瞭に示すものである。
期刊论文(3)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
浜地格: "Lipid Anchored Myoglobin 2. Effect of the Anchor Structure on membrane Binding" Chemistry Letters. 1175-1178 (1993)
Itaru Hamaji:“脂质锚定肌红蛋白 2。锚定结构对膜结合的影响”化学快报 1175-1178 (1993)。
DOI:
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发表时间:
期刊:
影响因子:
--
作者:
[]
通讯作者:
浜地格: "Energy Transfer from Za-Myoglobin to a Cyanine Dye Facilitated by Their Simultaneous Binding to a Phosphate Bilayer Membrane." Chemistry Letters. 1551-1554 (1993)
Itaru Hamaji:“同时结合磷酸盐双层膜促进从 Za-肌红蛋白到花青染料的能量转移”(1551-1554)。
DOI:
--
发表时间:
期刊:
影响因子:
--
作者:
[]
通讯作者:
浜地格: "Anisotropic Incorporation of Lipid-Anchored Myoglobin into a Phospholipia Bilayer Membrane." Jounal of the Anmerican Chemical Society. 115. 4966-4970 (1993)
Itaru Hamachi:“脂质锚定肌红蛋白各向异性掺入磷脂双层膜。”美国化学会杂志 115。4966-4970 (1993)
DOI:
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发表时间:
期刊:
影响因子:
--
作者:
[]
通讯作者:
Development of organic chemistry targeting biomolecules in live animals
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批准号:23H05405
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项目类别:Grant-in-Aid for Specially Promoted Research
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资助金额:$389.79万
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财政年份:2023
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负责人:浜地 格
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依托单位:
リガンド指向性化学の展開と新しい共有結合型阻害剤の開発
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批准号:22F31791
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$1.47万
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财政年份:2022
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负责人:浜地 格
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依托单位:
リガンド指向性化学の展開と新しい共有結合型阻害剤の開発
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批准号:22F21791
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$1.47万
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财政年份:2022
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负责人:浜地 格
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依托单位:
生細胞表層工学の新手法の開発と応用
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批准号:21F21701
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$1.47万
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财政年份:2021
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负责人:浜地 格
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依托单位:
リガンド指向性化学の展開と新しい共有結合型阻害剤の開発
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批准号:21F21791
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$1.41万
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财政年份:2021
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负责人:浜地 格
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依托单位:
Chemical engineering of the cell- and organelle-surface for biomedical applications
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批准号:21F31701
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$1.47万
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财政年份:2021
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负责人:浜地 格
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依托单位:
Ligand-directed chemistry as a tool for studying NMDA receptors in central nervous systems
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批准号:19F19808
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$1.41万
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财政年份:2019
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负责人:浜地 格
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依托单位:
ROS応答するラベル化分子の設計と条件付きプロテオミクスへの展開
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批准号:17F17344
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$1.54万
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财政年份:2017
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负责人:浜地 格
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依托单位:
アセチルコリンエステラーゼ駆動の自己組織化を活用したアミロイドベータの染色と阻害
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批准号:17F17045
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$1.47万
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财政年份:2017
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负责人:浜地 格
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依托单位:
癌診断と抗癌治療のための自己組織化スイッチオン・ナノ・プローブの開発
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批准号:16F16044
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$1.92万
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财政年份:2016
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负责人:浜地 格
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依托单位:
蛋白質ケミカルラベリングを基盤としたガン局在受容体分子イメージングの新技術
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批准号:12F02346
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$0.26万
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财政年份:2012
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负责人:浜地 格
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依托单位:
細胞内イメージングを目指した認識部位修飾フォルダマーによるタンパク質の認識
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批准号:07F07358
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$1.47万
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财政年份:2007
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负责人:浜地 格
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依托单位:
セミウェットチップを目指した超分子ヒドロゲルナノ空間中への蛋白質分子の封じ込め
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批准号:15655063
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项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
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资助金额:$2.3万
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财政年份:2003
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负责人:浜地 格
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依托单位:
固相脂質合成法による免疫制御能を有する人工スフィンゴ糖脂質の開発
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批准号:02F00396
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$1.54万
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财政年份:2002
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负责人:浜地 格
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依托单位:
タンパク質内ミクロ疎水空間を利用した蛍光性バイオセンサーの構築
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批准号:14045255
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$2.37万
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财政年份:2002
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负责人:浜地 格
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依托单位:
配位結合をトリガーとした自己組織化半合成酵素の活性スイッチ法の開発
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批准号:13031064
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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资助金额:$1.15万
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财政年份:2001
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负责人:浜地 格
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依托单位:
センサー機能分子の導入による外部環境応答性タンパク質の分子デザイン
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批准号:12019258
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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资助金额:$1.28万
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财政年份:2000
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负责人:浜地 格
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依托单位:
センサー機能分子の導入による外部環境応答性タンパク質の分子デザイン
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批准号:11132261
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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资助金额:$1.28万
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财政年份:1999
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负责人:浜地 格
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依托单位:
モジュール組み合わせ法による人工糖脂質ライブラリーの合成と分子集合特性の研究
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批准号:11878109
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项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
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资助金额:$0.58万
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财政年份:1999
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负责人:浜地 格
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依托单位:
センサー機能分子の導入による外部環境応答性タンパク質の分子デザイン
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批准号:10145245
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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资助金额:$1.28万
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财政年份:1998
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负责人:浜地 格
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依托单位:
海外基金