最近開発されたオリゴ糖の齲蝕原性のスクリーニング
筛选最近开发的低聚糖的致龋性
基本信息
- 批准号:06771985
- 负责人:
- 金额:$ 0.58万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:1994
- 资助国家:日本
- 起止时间:1994 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
研究概要::lactosylfructoside(O-β-D-galactopyranosyl-(1→4)-O-α-D-glucopyranosyl-(1←2)-β-D-fructofuranoside:ラクトスクロース(L.S.)は、その分子構造にラクトース骨格とスクロース骨格を有し、ヒト腸内細菌叢の改善効果が報告されている甘味度70%の三糖類である。今回、口腔レンサ細菌によるL.S.の代謝についてin vitro で検討した。材料と方法:供試菌株-S.sobrinus 6715、S.sanguis ATCC 15914、S.oralis ATCC 10557、S.gordonii Challis 1)口腔レンサ球菌の酸産生能の比較 実2日前よりBHI培地で、前日にGlucose、Galactose、Lactose、L.S.をそれぞれ終濃度0.2%で添加したTripticase peptone、Tryptone、Yeast extract培地で前培養を行った。実験当日、同じ糖濃度の新しい9倍容の同培地に植え継ぎ4時間培養後、遠心分離によって得られたpelletを150mM KC1・50mM MgSO_4で2回洗浄した。こうして得られたpelletを懸濁し37℃恒温槽中にて、0.1%の糖を代謝基質として与えpH=7.0にて50mMKOHで滴定し、酸産生能を評価した。2)S.oralis 10557によるL.S.の代謝機構 BHI培地で前培養後0.2%糖添加培地で24時間培養し、Iwamiらの方法に従い、トルエン・アセトン処理した菌液を用いて実験を行った。(1) 2-Nitrophenyl-β-D-galactopyranoside(ONPG)、O-Nitrophenyl-β-D-galactopyranoside-6-phosphate(ONPGP)の発色から菌液のβ-galactosidase、Phosphoβ-galactosidaseの活性を測定した。(2) 0.2%L.S.添加培地で培養し前述の方法で得られた菌液に、MgCl_2、終濃度5mMのL.S.を添加し、37℃恒温槽中にて分解され遊離してくる糖の濃度を酵素法で測定した。結果:1)L.S.を代謝基質とした場合、S.oralis 10557が最も高い酸産生能を示した。2)(1)Gal、L.S.で培養するとβ-galactosidaseが、LacではP-β-galactosidaseが誘導された。(2)経時的にGalの遊離が示された。以上より、S.oralis ATCC 10557がL.S.を代謝する際にはβ-galactosidaseが誘導され、これによってGalの遊離が起こることが示された。
Summary: Lactosylfructoside(O-β-D-galactopyranosyl-(1→4)-O-α-D-glucopyranosyl-(1 → 2)-β-D-fructofuranoside: Recut Secut (L.S.) The results of improving the intestinal bacterial flora were reported to be 70% sweet and trisaccharide. Now, the oral cavity bacteria can be detected by L.S. metabolism. Materials and Methods: The acid production ability of S.sobrinus 6715, S.sanguis ATCC 15914, S.oralis ATCC 10557, S.gordonii Challis 1 was compared with that of S. oralis 2 days before culture. After 4-hour incubation, the pellet was isolated by 150mM KC and 1.50 mM MgSO4 and washed twice. The pellet was suspended in a 37℃ incubator at pH=7.0 with 0.1% sugar as metabolic substrate and 50 mM KOH as titrant. Acid production was evaluated. 2) Metabolizing mechanism of S.oralis 10557 L. S. BHI before culture and after 0.2% sugar addition culture for 24 hours, Iwami's method of culture and treatment of bacteria solution was carried out. (1)2-Nitrophenyl-β-D-galactopyranoside(ONPG) and O-Nitrophenyl-β-D-galactopyranoside-6-phosphate(ONPGP) were used to determine the activity of β-galactosidase and Phosphoβ-galactosidase in bacterial solution. (2)0. 2% L.S. was added to the culture medium and the concentration of MgCl_2 and 5mM L.S. was determined by enzyme method. Results:1) L. S.oralis 10557 was the highest acid producing activity in the metabolic matrix. 2)(1)Gal, L. S., P-β-galactosidase and Lac-β-galactosidase are induced by Gal, L. S., P-β-galactosidase and Lac-β-galactosidase. (2)Gal is free from time to time. The above results indicate that S.oralis ATCC 10557 is metabolized by β-galactosidase and is free from Gal.
项目成果
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