放射線による突然変異誘発性DNA塩基損傷の生成とその修復酵素の研究

辐射诱变DNA碱基损伤的产生及其修复酶的研究

• 批准号: 06780438
• 负责人: 張 秋梅
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06780438/
• 关键词: 5-formyluracil; 修復酵素; X線; rpos(Rat F); GC-CGトランスバ-ジョン; mutator

(1)DNAをin vitroでX線照射したときの5-formyluracil(5-FU)の生成量は、8-oxoguanineやthymine glycolの生成量とほとんど同程度であった。5-FU修復酵素を同定するために、^<14>C-TTPでラベルしたpoly(dA-dT)-poly(dA-dT)を594Gy照射しethanol-soluble分画への5-FUの切り出しを測定した。本実験で、マウスおよびラットの肝抽出液の中にX線照射したDNAから5-FUを除去する酵素が存在していることを発見した。また、8-oxoguanineを修復する酵素の合成は葛西らが予想したのとは違ってrpoS(katF)によって調節されていることを明らかにすることができた。(2)GC-CGトランスバ-ジョンの原因となるグアニン損傷を同定するために次の研究を行った.大腸菌のCC103株はGC-CGトランスバ-ジョンが起こることによってのみ特異的にLac^+に復帰するので、この突然変異頻度を増大させる変異株をまず分離することにした。生じるコロニーのほとんど100%にLac+パピ-レが存在する株を分離することに成功した。この中には嫌気的条件ではmutatorとしての効果が現れないものがあり、それらはGC-CGトランスバ-ジョンの原因となるグアニンの酸化的損傷を修復できない変異株であると考えた。現在、これらの遺伝子のマッピングと解析を行っている。

(1)DNA in vitro is produced by X-ray irradiation of 5-formyluracil(5-FU), 8-oxoguanine and thymine glycol to the same extent. 5-FU repair enzymes were determined by poly <14>(dA-dT)-poly(dA-dT)-594Gy irradiation with ethanol-soluble fractions. The presence of 5-FU in liver extracts was detected by X-ray irradiation. 8-oxoguanine repair enzyme synthesis is not expected to be regulated by rpoS(katF). (2) The cause of GC-CG's failure and the determination of GC-CG's damage were studied. coli CC103 strain GC-CG strain was isolated from a large number of isolated strains. 100% success in isolation In this case, it is necessary to modify the condition of the mutant and the effect of the mutant. Now, this is the first time I've ever seen you.

项目成果

米井脩治、張秋梅、竹本忠司、: "細胞工学別冊「活性酸素実験プロトコール」(谷口直之編)" 秀潤社、東京, 336 (1994)

Shuji Yonei、Qiumai 张、Tadashi Takemoto：“细胞工程特卷‘活性氧实验方案’（由 Naoyuki Taniguchi 编辑），Shujunsha，东京，336（1994）

YONEI,S.,Q.M.ZHANGandT.TAKEMOTO: "Isolation and characterization of Escherichia coli strains containingnew genefusions inducible by superoxidestress" Frontiers of Reactive Oxygen Species in Biology and Medicine Elesevier,Amsterdam. 277-278 (1994)

YONEI,S.、Q.M.ZHANG 和 T.TAKEMOTO：“含有超氧化应激诱导的新基因融合的大肠杆菌菌株的分离和表征”生物学和医学中活性氧的前沿 Elesevier，阿姆斯特丹。

ZHANG,Q.M.,T.TAKEMOTO and S.YONEI: "The sensitivity of three soi mutants of Escherichia coli to oxidizing mutagens" Environ.Mutagen Res.Comm.16. 407-412 (1995)

张，Q.M.，T.TAKEMOTO 和 S.YONEI：“大肠杆菌的三种 soi 突变体对氧化诱变剂的敏感性”Environ.Mutagen Res.Comm.16。