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光による葉緑体遺伝子の転写後制御機構に関する生化学的研究

光对叶绿体基因转录后调控机制的生化研究

基本信息

批准号：
06740606
负责人：
金勝一樹
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Kitasato University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

光シグナル受容体の一つで独自のDNAを有する葉緑体は、光により多くの遺伝子発現が誘導される。我々は光による葉緑体遺伝子の発現制御機構についてプロテインキナーゼ(PKase)に視点をおいて解析してきた。これまでに、遺伝子発現調節に機能するとされるカゼインキナーゼII(CK-II)と、その特異基質としてmRNAの3′末端プロセッシングを制御する分子量34kDaのRNA結合因子(p34)をホウレンソウ葉緑体中に見いだし、CK-IIによるp34のリン酸化が葉緑体遺伝子の転写後制御機構に重要な生理的な役割を持つことを明らかにしている。そこで平成6年度は、p34の効率的な精製法を確立し、さらにp34と相互作用を持つ因子の検索を生化学的に行うことにより、最終的に葉緑体遺伝子の転写後制御のメカニズムを解明することを目的として研究を行った。1.p34がssDNAに対して強い結合性を持つことを利用して、ssDNA-celluloseカラムクロマトグラフィーによってホウレンソウ葉緑体粗抽出画分からp34を効率的に単一polypeptideまで精製する方法を確立した。2.精製p34画分中にはCK-II活性が検出され、p34は葉緑体中でCK-IIと複合体を形成していることが考えられた。3.確立した精製法による解析から、CK-IIの特異基質となるRNA結合因子(33-39kDa)は植物種に共通して存在することが明らかになった。4.p34の精製過程でCK-II-p34に対して強い親和性を持つ分子量46kDaのPKase(PK-46)を新たに見いだした。5.PK-46は分子量24kDaのRNA結合性タンパク質をin vitroでリン酸化することが明らかになった。以上の結果から、CK-IIによるRNA結合因子のリン酸化を介した葉緑体遺伝子の転写後制御機構は、植物種に共通して存在し、さらに本機構にはPKaseを中心とした数種の因子が関与していることが考えられた。

There are two kinds of light-emitting devices, such as light-emitting capacitors, light-emitting DNA, light-emitting capacitors, and so on. We would like to check the information system of the imperial authority to make sure that the information system (PKase) is used to analyze the information system. The molecular weight of 34kDa, RNA binding factor (p34), molecular weight, molecular weight, molecular weight, The CK-II instrument p34 is used to acidify the physiology of the Imperial Organ. After the system is written, the important physiology of the Imperial Organ is maintained. In the year 6, the precision method for determining the rate of p34, the interaction between p34 and p34, the biochemistry of biochemistry, and the most important data were used to make sure that the purpose of the study was to understand. The combination of 1.p34 and ssDNA cycles is based on the determination of the accuracy of the method of rough extraction of the body. The accuracy of the method is based on the accuracy of the method of gross extraction of the body. The accuracy of the method is accurate. two。 The complex of CK-II activity in p34 and CK-II complex in p34 was formed. 3. Make sure that you need to analyze the data, CK-II the RNA binding factor (33-39kDa), and make sure that there is something in common in plants. The process of 4.p34 testing is to enhance the molecular weight of CK-II-p34 and to maintain the molecular weight of 46 kDa PKase (PK-46). The molecular weight of 5.PK-46, 24kDa, RNA, in vitro, acid, acid and acid. The results of the above results, the CK-II RNA combination factor acidification, the system of the system after writing, the plant plant common to each other, and the evaluation of several factors and laboratory tests in the center of the PKase laboratory.