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老人斑形成におけるアミロイド前駆体蛋白からのβ蛋白形成過程の形態学的研究

老年斑形成中淀粉样前体蛋白形成β蛋白过程的形态学研究

基本信息

批准号：
06770775
负责人：
高橋正
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Juntendo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

アルツハイマー型痴呆の老人斑形成におけるアミロイドβ蛋白とその前駆体蛋白(APP)の関係を解明するために、DAT脳の大脳皮質においてβ蛋白とAPPに対する抗体による免疫染色に加え、アミロイドP成分(AP)およびアポリポ蛋白Eに対する抗体を用いて免疫染色を行い、形態学的な検討を行った。今回用いた抗APP抗体は錐体細胞の細胞膜周囲と一部の老人斑周囲を薄染したが、老人斑での染色性は不明瞭でabnormal neuriteの形態的な確認は困難であった。使用した抗体の特性によるものとも考えられ、他の抗APP抗体を用いた免疫染色も施行したが同様の結果であり、組織の固定法自体からの検討が必要であると思われた。アミロイドβ蛋白とAPの関係については、mirror image法を用いた検討では各タイプの老人斑で両者の分布の大半が一致していることが示された。しかし、アミロイドβ蛋白の存在を調べるためにはギ酸処理が必要であるが、APの抗原性はギ酸処理により減弱するため、両者を同時に検討することは困難であった。そのため、今回は抗AP抗体に代わるものとして、APと同様に老人斑と神経原線維変化の両者に分布するアポリポ蛋白Eに対する抗体を使用した。アポリポ蛋白Eはギ酸処理による抗原性の変化が少ないといわれており、これを仲立ちとして、アミロイドβ蛋白その他の老人斑構成成分について形態学的な検討を進めたが、抗アポリポ蛋白E抗体と抗アミロイドβ蛋白抗体による二重染色を共焦点レーザー顕微鏡により検討したところ、両者は異なった分布を示しアポリポ蛋白Eの沈着がアミロイドβ蛋白の沈着・成長過程に反比例して存在する可能性を示す結果が得られた。

To clarify the relationship between beta protein and precursor protein (APP) in senile plaque formation in Alzheimer's disease, immunostaining and morphological analysis were performed for antibodies to beta protein and APP in the cortex of DAT patients. The anti-APP antibody was used to detect the cell membrane of pyramidal cells, and some of the age-related plaques were stained thinly. The staining of age-related plaques was unclear. The morphology of abnormal neurons was difficult to confirm. The characteristics of the antibody were examined and the results of immunostaining with other anti-APP antibodies were analyzed. The relationship between β-protein and AP was discussed by using mirror image method, and the distribution of β-protein was mostly consistent among all the groups. It is necessary to regulate the presence of beta protein, and it is difficult to detect the presence of beta protein. Anti-AP antibodies are used in the distribution of age-related proteins. Antigenicity of protein E is changed by acid treatment. Morphological analysis of age spots is carried out. Anti-protein E antibody Anti-protein β antibody is stained by double staining. Confocal microscopy is used. The distribution of protein E in different species was shown to be proportional to the growth of protein E.