シェ-グレン症候群の唾液腺実質細胞におけるアポトーシスとFasの発現

干燥综合征唾液腺实质细胞凋亡及Fas表达

• 批准号: 07771621
• 负责人: 柴田 恭明
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771621/
• 关键词: シェ-グレン症候群; 唾液腺; アポトーシス; Fas

これまでに、シェ-グレン症候群(SS)口唇小唾液腺実質の破壊・消失はアポトーシスによるものであり、さらにこのアポトーシスにFasが関与している可能性をin situ TdT(TdT)反応およびFas免疫染色を用いて示してきた。本年度の計画は、1)摘出されたSS唾液腺から電顕標本を作成し、形態的にアポトーシスを確認する。2)さらにTdT陽性細胞の形態を、電顕的に検索する。3)ヒトFas cDNAを用いてSS唾液腺にISHを施し、mRNAレベルでFasの発現を追認することであった。今回、1)摘出されたSS小唾液腺組織を電顕用に包埋し、電顕観察をおこなったが、典型的なアポトーシスの像は観察されなかった。そこで、TdT反応が顕著に陽性であったパラフィン標本から唾液腺小葉を切り出し、電顕用標本を作成し、超薄切片として電顕観察をおこなったところ、導管細胞に細胞質および核の濃縮、細胞質の空胞化、および典型的なapoptotic bodyが観察された。これらの結果は、TdT反応陽性細胞すべてが典型的なアポトーシス像を示すものではなく、DNAフラグメンテーションをおこしていながら形態的には正常な核が多数存在することを示唆している。これを明らかにするために、現在、2)電顕切片におけるin situ TdT反応を実行中である。3)について、ヒトFas cDNAをチミンダイマー化し、SS小唾液腺にIn situハイブリダイゼーションを施行したところ、導管・腺房細胞に顕著なFas mRNAの発現がみられた。これは、Fas免疫染色の結果と一致し、SS実質細胞におけるFasの発現をタンパク・mRNAレベルで確認できた。すなわち、少なくともSS唾液腺導管の消失はアポトーシスによるものであり、これにFasが関与することが強く示唆された。

Therefore, the physical destruction and disappearance of the small salivary glands in the lips of patients with Sitz-Gelen syndrome (SS) can be seen in the mouth, and the possibility that Fas is related to this disease is demonstrated in situ TdT(TdT) anti-inflammation and Fas immunostaining. This year's plan includes: (1) extraction of SS salivary glands, preparation of electrical and morphological data, and confirmation of their status. 2) The morphological and electrical characteristics of TdT positive cells were investigated. 3) Fas cDNA expression in SS salivary glands is expressed in ISH, mRNA expression in Fas is expressed in mRNA. 1) The small salivary gland tissue was extracted and embedded with electricity. TdT positive cells were cut out of salivary gland leaflets, electroporated cells were prepared, ultra-thin sections were electroporated, cytoplasm and nucleus were concentrated, cytoplasm was vacuolized, and typical apoptotic bodies were observed. The results showed that TdT anti-positive cells were typical of normal nuclei, and DNA anti-positive cells were typical of normal nuclei. 2) Electrical slice in situ TdT 3) Fas mRNA expression In small salivary glands, ducts, and ovary cells was detected. The results of Fas immunostaining were consistent with those of SS cytoplasmic cells, and Fas expression was confirmed by PCR. The salivary ducts disappear, and there is no evidence that they are related to the disease.