酵母GAL80遺伝子の転写開始点結合タンパク質の機能解析

酵母GAL80基因转录起始位点结合蛋白的功能分析

• 批准号: 07780608
• 负责人: 桜井 博
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07780608/
• 关键词: 酵母; 転写開始点; 転写制御

II型遺伝子のコアプロモーターはTATA boxと転写開始点領域(Initiator;Inr)から構成されており、この上に基本転写因子が形成し基礎転写を行う。本研究では、酵母のガラクトース代謝系遺伝子の転写抑制因子をコードするGAL80遺伝子の転写開始領域Inrに結合するタンパク質の機能解析を行った。1.GAL80の転写開始付近のどの領域にInr結合タンパクが結合するかをDNaseI Footprint法とメチル化干渉法により決定した。その結果、転写開始点の-18から+10に結合することが明らかになった。2.Inr結合タンパクがInr領域に結合することがInrからの転写に必須であることを無細胞転写反応により明らかにした。3.ほ乳類のInrは転写活性化(UAS)または抑制領域(URS)として機能する場合がある。そこで、GAL80のInrも酵母内においてUAS・URSとして機能するかを調べたが、この領域は、転写活性に影響を与えず基本プロモーターとして機能することが示された。Inr結合タンパクをDNAアフィニティークロマトグラフィー法で精製、または、遺伝学的手法によるクローニングを試みたが、現在成功には至っていない。今後は、Inr結合タンパクをクローニングし、さらに詳細に解析すると共に、転写開始における機能を明らかにする必要がある。

Type II genetic code is divided into two parts: TATA box and Initiator;Inr. In this study, we analyzed the function of the gene inhibitor of the yeast metabolic system and the gene inhibitor of the GAL80 gene. 1. GAL80 's writing start is determined by the DNase I Footprint method and the DNase I Footprint method. The result is that the writing start point is-18,+10, and the combination is clear. 2. Inr is integrated with the Inr domain, which is necessary for writing Inr, and it is clear that cell-free writing is required. 3. In the case of breast cancer, UAS and URS are not functional. GAL80 is a yeast cell with UAS, URS, and functions. Inr is a combination of DNA and genetic techniques. In the future, Inr will be able to combine the following functions: detailed analysis, writing start, etc.

项目成果

桜井 博: "蛋白質核酸酵素「遺伝子機能と転写因子」(印刷中)" 共立出版, 9 (1996)

樱井宏：“蛋白质核酸酶“基因功能和转录因子”（出版中）”Kyoritsu Shuppan，9（1996）

桜井 博: "Bio Science用語ライブラリー転写因子" 羊土社, 8 (1995)

樱井浩：《生物科学术语库转录因子》Yodosha，8 (1995)