中枢神経系におけるジアシルグリセロールキナーゼの分子多様性の解析

中枢神经系统二酰甘油激酶的分子多样性分析

• 批准号: 07780670
• 负责人: 後藤 薫
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07780670/
• 关键词: ジアシルグリセロール; クローニング; 脳; 核; mRNA

これまでクローニングして得たI型、II型およびIII型DGキナーゼのcDNAを用いて、脳および網膜から抽出したmRNAをもとにして作製したcDNAライブラリーを低いstringencyの条件でスクリーニングした結果、新しいDGキナーゼアイソザイム(IV型)のクローンを得ることができた。このIV型はこれまでのI型からIII型のものとは異なり、その一次構造中にカルシウム結合部位であるEFハンド構造を欠き、またカルボキシル基端側に4つのアンキリン類似配列を含んでいた。このような構造上の特徴は近年クローニングされたショウジョウバエの網膜変性変異体(retinal degeneration A,redgA)の原因遺伝子であるrdgA-DGキナーゼのものと酷似していることが判明した。さらにこのIV型は核移行シグナルをも含んでおり、核内の情報伝達係に関与することが示唆された。そこでこのIV型DGキナーゼのcDNAを培養COS細胞に遺伝子導入し種々の性質を調べた。一次構造中にEFハンド構造を持たないことから予想されたように、DGに対するリン酸化反応がカルシウム非依存性であった。またepitope tag(抗原決定基マーカー)を用いた実験では免疫細胞化学的にIV型DGキナーゼの核内局在が証明された。これらの所見はIV型DGキナーゼの機能のみならず、核内におけるリン脂肪代謝の解明にも有意義なものと思われる。

The gene expression of type I, type II and type III DG was detected by PCR. The gene expression of type I, type II and type III DG was detected by PCR. The type IV structure is similar to the type I structure, type III structure and type III structure. In recent years, the structural characteristics of this kind of structure have been clarified. The type IV nuclear migration system contains information related to nuclear communication. The cDNA of type IV DG was introduced into COS cells in culture, and the properties of the gene were modulated. In the primary structure, the structure is independent of each other. Epitope tag is used in immunocytochemistry to demonstrate the presence of DG in the nucleus. The findings of this study are significant for the functional and intracellular understanding of lipid metabolism in type IV DG.