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アデノウイルスベクターによる血液細胞機能改変の検討

腺病毒载体对血细胞功能修饰的检查

基本信息

批准号：
07807212
负责人：
倉田寛一
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Saitama Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至 1996
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では当初の計画の通り,アデノウイルスベクター(AdV)を用いて以下の検討を行なってきた。(1)各種サイトカイン発現アデノウイルスベクターの作製とin vitro感染実験各種サイトカイン(hGM-CSF,mGM-CSF,mIL-2,mIL-4,mIFN-γなど)発現ベクターを作製し,COS細胞や白血病細胞株などにおけるサイトカイン発現をELISAやluciferase assay等により検討したところ,MOI依存的に一過性発現パターンを示した。また,マウスへの経静脈的投与では発現は第3-7日目をピークに第14日目まで観察された。(2)各種サイトカインレセプター発現ベクターの作製と遺伝子発現効率の検討ヒトGM-CSFレセプターαおよびβ鎖,β鎖の変異分子などの発現AdVを作製した。これらのベクターはJurkat,COS,NIH3T3細胞などに高効率かつ高レベルに外来性レセプター分子を発現したが,Tリンパ球などビトロネクチンレセプター低発現細胞に対しては数%の細胞に低レベルの発現しか認められなかった。(3)各種サイトカインレセプター発現ベクターの作製とシグナル伝達の検討ヒトGM-CSFレセプターαおよびβ鎖発現ベクターをNIH3T3細胞に感染させ,サイトカイン応答性の獲得を^3H-thymidine取り込みやc-fos-luciferase assayにより検討し,ヒトGM-CSF依存性に反応性が認められる傾向があったが,感染による細胞変性などばらつきも大きく確定には至っていない。以上の結果をもとに造血幹細胞や腫瘍細胞の増殖・分化を外来性レセプター発現ベクターにより制御するシステムの研究を続行している。(本研究代表者は平成8年7月末をもって埼玉医科大学を退職し科学技術振興事業団に転任したため年度途中で本研究費の使用を中断するに至った。)

The purpose of this study is to use the following information for the following information on the general information of the original plan, which is called "AdV". (1) all kinds of mice were infected with in vitro, hGM-CSF,mGM-CSF,mIL-2,mIL-4,mIFN- γ cells were infected, and COS cells were infected with leukemias. Cell lines of leukemia cells were infected with ELISA and luciferase assay. The transient nature of MOI dependencies is shown to be significant. This is the third day, the third day, the 14th day, the third day, the seventh day, the 14th day. (2) all kinds of chemicals have been used to determine the frequency of GM-CSF, alpha, β, AdV, and β, respectively. The percentage of Jurkat,COS,NIH3T3 cells is higher than that of the control group. The number of cells is lower. (3) in all kinds of health care systems, all kinds of health care providers do not know that they are infected with GM-CSF cells, that they are infected with NIH3T3 cells, that they are not infected, that they are infected, that they are not infected, that they are infected, that they are not infected, and that they are not affected by 3H-thymidine, and that they are sensitive to c-fos-luciferase assay, and that they are not affected by GM-CSF dependence. The infection is caused by the infection of the cell. The above results show that the hematopoietic progenitor cells proliferate, differentiate and differentiate into exotic hematopoietic cells. The results show that there are significant differences in the control and control of hematopoietic cells. (the representative of this study, Pingcheng, at the end of July 2008, asked Yu Medical University to retire the science and technology vibration program during the whole year.)