RAG発現誘導に関与する分子の同定

鉴定参与 RAG 表达诱导的分子

• 批准号: 07857024
• 负责人: 田合 ひろみ
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07857024/
• 关键词: リンパ球初期分化; ストローマ細胞; 組み換え活性化遺伝子(RAG)

我々はこれまでに、マウスストローマ細胞株(PA6)が、我々の樹立したヒトリンパ球前駆細胞株(FL細胞)に対し、ヒトサイトカイン(IL‐3,IL‐6,IL‐7)存在下で、組み換え活性化遺伝子(RAG)の発現を誘導し得ることを示してきた。又、PA6の中にはFL細胞に対するRAG誘導能を持つサブクローン(PA6+)と、持たないサブクローン(PA6-)が存在することも明らかにしてきた。今回我々は、ディファレンシャルディスプレイ法を用い、PA6+に特異的に発現する遺伝子の単離を試みた。PA6+およびPA6-由来RNAを用い、オリゴd(T)プライマーと(N)10プライマーにてRT-PCRを行う。PA6+由来RNAのみに増幅された遺伝子断片を分離し、これをプローブとして、PA6+cDNAライブラリーのスクリーニングを行った。その結果、221アミノ酸よりなるオープン-リーディング-フレームを含む1.0kbのcDNA(C2.3)が単離された。この遺伝子は、既知の遺伝子とのホモロジーは無く、そのアミノ酸配列より4つの膜貫通部位を有する膜結合蛋白であると推察される。さらに、この遺伝子を導入することにより、PA6-がRAG誘導能を有するようになることを確認した。これらのことから、我々の単離したC2.3がリンパ球前駆細胞に対するRAG発現誘導に関わるストローマ細胞上の分子をコードする遺伝子であることが示唆される。

The PA6 cell line (PA6), the preglobular cell line (FL cell), the preglobular cell line (IL-3,IL-6,IL-7), and the active cell line (RAG) were detected. In addition, in the PA6 system, there is a clear indication of the presence of FL cells and RAG commands that do not exist in the PA6+ or PA6- system. This time, we will tell you how to use the method and the PA6+ special method. You will not be able to leave the test. PA6+ RT-PCR PA6-the cause of the RNA is to use the following lines: (t), (T), (T), (N) 10, and so on. The reason for PA6+ is that RNA fragments are separated, separated, and PA6+cDNA fragments are separated from each other. The results showed that 221 kb cDNA (C2.3) was found to contain 1.0 kb cDNA (C2.3). It is known that the membrane binding protein is located in the membrane connection part of the membrane, and the membrane binding protein is detected in the membrane connection site. If you want to enter the PA6- RAG, you will be able to confirm that you are not required. Please tell me that the cell in front of the ball is located in C2.3. The cell in front of the ball, the RAG, shows that the molecules on the cell are instigated.