RAG-1発現誘導因子の単離と同定

RAG-1表达诱导剂的分离与鉴定

• 批准号: 06857023
• 负责人: 田合 ひろみ
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06857023/
• 关键词: RAG; ストローマ細胞; リンパ球初期分化

1.FL細胞に対するRAG発現誘導マウスストローマ細胞株PA-6と共培養することによって、FL細胞にRAG-1およびRAG-2の発現が誘導された。この発現誘導には、ヒトIL-3、IL-6、IL-7の存在が必要であり、三者は相乗的に働く。またメンブレンフィルターを用いて、FL細胞とPA-6との物理的接触を阻害するとRAG発現誘導が見られなくなるが、PA-6のパラホルムアルデヒドによる固定はRAG誘導に影響を与えない。これらのことから、FL細胞に対するRAG発現誘導には、PA-6細胞との接触が必要であり、PA-6の産生するサイトカインは関与しないことが明らかとなった。2.FL細胞に対するrecombinase活性の誘導サイトカイン存在下で、PA-6と共培養を行うことによってFL細胞にRAGが誘導されるが、このRAG発現量はヒトプレB細胞株Nalm6の10^<-3>〜10^<-4>と微量である。この誘導されるRAGが機能的であるかどうかを確かめるために、我々の確立したRAGの誘導系でrecombinase活性が誘導されるかどうかを検討した。FL細胞にrecombinaseの基質として、マウス免疫グロブリンH鎖D-J領域を含むプラスミドDNAを導入し、サイトカイン存在下でPA-6と共培養を行った。FL細胞においてはrecombinase活性は0%であったが、共培養後は3-6x10^<-4>%となり、この系において誘導されるRAGが機能的であることがわかった。以上のことより、PA-6細胞膜上の分子とIL-3、IL-6、IL-7からのシグナルによって、FL細胞にRAG発現が誘導され、さらには遺伝子再構成が起こることが示唆された。

The 1.FL cell line PA-6 was co-cultured and the RAG-1 cell line RAG-2 was detected. It is found that there are necessary guidelines for guidance, IL-3, IL-6 and IL-7 for each other. Do you want to know how to use the FL cell to PA-6 the physical contact? to block the RAG to show that the guide is sensitive, the PA-6 is sensitive, and the RAG guide is fixed. Please tell me that the FL cell is in contact with the necessary device, that the PA-6 cell is in contact with the necessary device, that the PA-6 cell is in contact with the necessary device, and that the PA-6 cell is sensitive to each other. 2.FL cell culture, recombinase activity assay, cell line Nalm6 10 ^ & lt;-3>~ 10 ^ & lt;-4> cell line Nalm6 10 ^ & lt;-3>~ 10 ^ & lt;-4> cell line Nalm6 10 ^ & lt;-3>~ 10 ^. The operator of the RAG machine is responsible for making sure that the RAG is active and that the recombinase is active. FL