RAG-1発現誘導因子の単離と同定

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1.FL細胞に対するRAG発現誘導マウスストローマ細胞株PA-6と共培養することによって、FL細胞にRAG-1およびRAG-2の発現が誘導された。この発現誘導には、ヒトIL-3、IL-6、IL-7の存在が必要であり、三者は相乗的に働く。またメンブレンフィルターを用いて、FL細胞とPA-6との物理的接触を阻害するとRAG発現誘導が見られなくなるが、PA-6のパラホルムアルデヒドによる固定はRAG誘導に影響を与えない。これらのことから、FL細胞に対するRAG発現誘導には、PA-6細胞との接触が必要であり、PA-6の産生するサイトカインは関与しないことが明らかとなった。2.FL細胞に対するrecombinase活性の誘導サイトカイン存在下で、PA-6と共培養を行うことによってFL細胞にRAGが誘導されるが、このRAG発現量はヒトプレB細胞株Nalm6の10^<-3>〜10^<-4>と微量である。この誘導されるRAGが機能的であるかどうかを確かめるために、我々の確立したRAGの誘導系でrecombinase活性が誘導されるかどうかを検討した。FL細胞にrecombinaseの基質として、マウス免疫グロブリンH鎖D-J領域を含むプラスミドDNAを導入し、サイトカイン存在下でPA-6と共培養を行った。FL細胞においてはrecombinase活性は0%であったが、共培養後は3-6x10^<-4>%となり、この系において誘導されるRAGが機能的であることがわかった。以上のことより、PA-6細胞膜上の分子とIL-3、IL-6、IL-7からのシグナルによって、FL細胞にRAG発現が誘導され、さらには遺伝子再構成が起こることが示唆された。