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骨芽細胞様細胞に機械的刺激を加えた際のサイトカイン発現様相について

对成骨细胞样细胞施加机械刺激时细胞因子的表达

基本信息

批准号：
07857151
负责人：
森山啓司
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07857151/
关键词：
骨芽細胞歯根膜細胞口蓋粘膜細胞機械的刺激 interleukin-6

项目摘要

ヒト骨肉腫由来骨芽細胞様細胞MG63を、底面が可動性を有する培養用シャーレを用いて培養し、Flexercell Strain Unitを用いて底面に陰圧を加え、細胞に反復伸展性刺激を加えた。また、対照群としては、底面が可動性を有さないシャーレを用いて培養を行い、cAMP産生量の変化について検討を行ったところ、刺激の有無による有意な差を見出すことはできなかった。そこで、当初の実験計画を変更し、MG63の他に、ヒト歯根膜線維芽細胞(PDLF)、ヒト口蓋粘膜線維芽細胞(PTF)を加えた3種類の細胞をそれぞれコラーゲンゲル中で培養し、ゲルがシャーレに張り付いた状態で培養する群(attatch群)と、ゲルをシャーレから剥がして張力を解放させた状態で培養する群(release群)に分け、骨代謝との関わりが深いサイトカイン、interleukin-6(IL-6)の培養上清中への放出量を、ELISA法を用いて比較検討した。なお、release群におけるゲル収縮量は、PDLF,PTF,MG63の順で大きかった。まず、PDLFのattatch群では、培養開始48時間後に回収した培養上清に比べ、次の48時間、すなわち培養開始48時間から96時間後に回収した培養上清の方が約2倍高い濃度のIL-6を含んでいることが明らかとなった。また、release群では最初の48時間と次の48時間のIL-6放出量に有意な差を認めず、いずれもattatch群の最初の48時間のものと同等レベルであった。一方、PTFのattatch群では、PDLF同様、最初の48時間に比べ、次の48時間の方がIL-6放出量が多かったが、release群の放出量はいずれの時間帯においてもattatch群の10-15%程度と低い値にとどまっていることが分かった。また、MG-63の培養上清中にはIL-6を検出することは出来なかった。以上の結果より、ヒト歯根膜由来線維芽細胞やヒト口蓋粘膜由来線維芽細胞に力学的刺激を加えると、これらの細胞のサイトカイン産生に大きな変化が生じることが明らかとなった。

The osteoma is derived from the bone bud cell MG63, and the bottom surface has mobility. The culture is used for culture. The Flexercell Strain Unit is used for culture. The bottom surface has negative pressure. The cell has repeated stretching stimulation. In addition, there is no change in the mobility of the bottom surface. In addition, there is a change in the amount of cAMP produced by the culture. In addition, there is a change in the amount of cAMP produced by the stimulation. In addition, three types of MG63 cells were added, including PDLF and PTF cells. The cells were cultured in medium and in medium.(attatch group),(release group),(bone metabolism),(interleukin-6(IL-6)), and (ELISA) were used to compare and discuss the release amount of interleukin-6(IL-6) in culture supernatant. The release group is composed of PDLF, PTF,MG63 and other components. The concentration of IL-6 in culture supernatant was about 2 times higher than that in culture supernatant after 48 hours of culture. The IL-6 emission from the first 48 hours of the release group was significantly different from that from the first 48 hours of the release group. One side, PTF attatch group, PDLF, first 48 hours, second 48 hours, IL-6 release amount, release group, attatch group, 10-15% of the time, low middle value, low value, low value, low The supernatant of MG-63 culture was isolated from IL-6. As a result of the above, the root membrane derived from the vascular bud cells and the flap mucosa derived from the vascular bud cells were stimulated by mechanical stimulation.