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DNA組換えと組換え修復の普遍的機構

DNA重组和重组修复的普遍机制

基本信息

批准号：
08280102
负责人：
品川日出夫
金额：
$ 132.48万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

DNA組換えと組換え修復の普遍的機構を解明するために、大腸菌、古細菌、酵母、動物などを研究材料として遺伝学的・細胞学的・生化学的手法を駆使して研究した。本年度の主要な成果として:1.品川らは組換え中間体Holliday構造に作用して、交叉点移動を行わせるモータータンパク質RuvBのWalkerモチーフAのミュータントを作成して、このモチーフがATP結合、ATP分解、DNAとの結合、RuvAとの相互作用、6量体形成に重要な役割を果たしていることを明らかにした。古細菌にHolliday構造を特異的に切断して解離する酵素Hjcを同定し、この酵素をコードする遺伝子hjcをクローニングして解析した。この結果古細菌における組換え反応もHolliday構造の形成と解離という機構で起ることを明らかにした。2.堀内らは大腸菌においてプラスミドDNAの複製が複製の終結因子Tusの発現によって阻害されるとSOS反応が誘導され、SOS誘導はrecAとlexA遺伝子によって支配されていることを証明した。3.森田らはマウスの減数分裂期組換えに重要なタンパク質RAD51とDMC1が精原細胞の第1減数分裂前期で複合体を形成して染色体に結合していることを、それらに対する特異的抗体を利用して細胞学的方法で明らかにした。これらは染色体のコアタンパク質であるCOR1とも結合していることも明らかにした。4.武田らは相同的組換えの前期過程と非相同的エンドジョイニングで重要な役割を果たすMRE11タンパク質がニワトリ細胞において生存に必須であり、MRE11の欠損は染色体の切断をもたらすことを明らかにした。5.小林は相同組換えの頻度は2分子DNA間のホモロジーの長さに依存することを組換え中間対の交叉点移動によるランダムウォーキングのモデルで説明した。今回は実験的に、ミスマッチ修復系が働いている場合は2分子のDNA間のホモロジーが減少すると急激に組換え頻度が低下するが、更にホモロジーが減少すると低下はゆるやかになり、更にDNA配列の差異が大きくなると反比例することを明らかにした。このことは交叉点がミスマッチの領域にかかるとミスマッチ修復系の活性レベルに依存して、組換え中間体が破壊されると仮定すると説明できた。

DNA sequencing and repair of common mechanisms for understanding, coliform, archaea, yeast, animals, research materials, cytological, biochemical methods, research The main achievements of this year are as follows:1. The formation of ATP binding, ATP decomposition, DNA binding, RuvA interaction, and 6 important effects of quantum formation in the formation of intermediate Holliday structure and cross-point movement. The Holliday structure of archaea is characterized by the presence of Hjc and the presence of Hjc. As a result, the formation and dissociation of Holliday structures in archaea 2. The replication of DNA in E. coli and the production of replication termination factor Tus were proved to be inhibited by SOS reverse induction and SOS induction. 3. Morita's cytological approach to meiotic organization is clear: the first meiotic complex of spermatogonia is formed by chromosome binding and antibody specific to the first meiotic complex. The color of the material is not the same as the color of the material 4. Takeda has the same early stages of structural transformation and different early stages of structural transformation. MRE11 has the same early stages of structural transformation and different early stages of structural transformation. MRE11 has the same early stages of structural transformation and different early stages of structural transformation. MRE11 has the same early stages of structural transformation and different early stages of structural transformation. 5. The frequency of the same group of Kobayashi DNA is dependent on the length of the group of DNA. In this case, the DNA sequence between the two molecules is reduced, and the frequency of rapid transformation is reduced. The activity of the repair system depends on the composition of the intermediate.