DNA損傷と活性酸素に適応するための大腸菌遺伝子群の発現と機能

大肠杆菌适应DNA损伤和活性氧的基因簇的表达和功能

• 批准号: 01655503
• 负责人: 品川 日出夫
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01655503/
• 关键词: レギュロン; DNA修復; 突然変異; アクチベ-タ-; レプレッサ-; ATP分解酵素; ruvAB遺伝子; umuDC遺伝子

活性酸素、特に過酸化水素による細胞の損傷を防ぐための応答と、DNAの損傷に対する大腸菌の応答機構を研究して以下の結果を得た。1.過酸化水素に対する適応応答のレギュロンのアクチベ-タ-遺伝子oxyRをクロ-ニングし、全塩基配列を決定した。更にkatGタンパクが、自分自身の発現にはレプレッサ-として機能し、KatGに代表されるレギュロンの遺伝子に対してはアクチベ-タ-として機能することを証明した。OxyRタンパクを精製し、oxyR及びkatG遺伝子上の結合領域を明らかにした。2.DNAの組換え修復に関与しているruvB遺伝子と共にオペロンを形成している遺伝子ruvAの欠失株を作成して、ruvAもDNA修復に関与していることを証明した。3.RuvBタンパクを大腸菌で多量に産生させる株をつくり、このタンパクを高度に精製することに成功した。RuvBタンパクはATPとADPに結合して、弱いATPase活性をもつことがわかった。4.紫外線や多くの化学物質による突然変異の誘発に関与するumuDおよびumuC遺伝子産物の多量生産株をつくることに成功した。現在これらのタンパク質を精製する作業を進めている。5.DNA損傷によって発現が誘導されるが機能がわかっていないdinA遺伝子をクロ-ニングした。現在その遺伝子の塩基配列の決定と、機能を研究している。

The following results were obtained from the study on the response mechanism of E. coli to cell damage and DNA damage 1. To determine the appropriate reaction conditions for peracidified water and the overall base configuration of oxy-R In addition, KatG represents the development of the new generation. OxyR, oxyR and katG are the most important components in the field of synthesis. 2. DNA repair is related to the formation of ruvB genes and the formation of ruvA genes. 3. RuvB is produced in large quantities and highly refined. RuvB is the most active form of ATP and ADP. 4. UV-rays and many chemicals induce sudden changes in production and production of umuD and umuC gene products. Now, the quality of the product is refined. 5. DNA damage is induced by DNA damage. Now, we study the determination and function of the gene base arrangement.

项目成果

K.Tao: "Molecular cloning and nucleotide sequencing of oxyR,the positive regulatory gene of a regulon for adaptive response to oxidative stress in Escherichia coli:homologies between OxyR protein and a family of bacterial activator proteins." Mol.Gen.Gene

K.Tao：“oxyR 的分子克隆和核苷酸测序，oxyR 是大肠杆菌中对氧化应激适应性反应的调节子的正调控基因：OxyR 蛋白与细菌激活蛋白家族之间的同源性。”

H.Iwasaki: "Involvement in DNA repair of the ruvA gene of Escherichia coli." Mol.Gen.Genet.219. 329-331 (1989)

H.Iwasaki：“参与大肠杆菌 ruvA 基因的 DNA 修复。”

T.Shiba: "proteolytic activation of UmuD and MucA proteins for SOS mutgenesis" edited by Y.Kuroda,D.M.Shankel,and M.D.Waters Antimutagenesis and Anticarcinogenesis Mechanisms II.Plenum Publishing Corporation. 353-356 (1990)

T.Shiba：“UmuD 和 MucA 蛋白的蛋白水解激活用于 SOS 诱变”，由 Y.Kuroda、D.M.Shankel 和 M.D.Waters 编辑，Antimutagenesis and Anticarcinogenesis Mechanisms II.Plenum Publishing Corporation。

H.Iwasaki: "Overproduction,purification,and ATPase activity of the Escherichia coli RuvB protein involved in DNA repair." J.Bacteriol.171. 5276-5280 (1989)

H.Iwasaki：“参与 DNA 修复的大肠杆菌 RuvB 蛋白的过量生产、纯化和 ATP 酶活性。”