電位依存性カルシムチャネルの不活性化機構と不整脈の研究

电压依赖性钙通道失活机制与心律失常的研究

基本信息

批准号：
08670072
负责人：
中井淳一
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Okazaki National Research Institutes
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08670072/
关键词：
カルシウムチャネル低カリウム性周期性四肢麻痺

项目摘要

Lonf QT症候群(LQT)は遺伝性の心臓不整脈の1つで電位依存性カルシウムチャネルやナトリウムチャネルの異常が報告され、現在までのところ、LQT3でナトリウムチャネルの不活性化領域の異常であることが明らかにされている。また最近、低カリウム性周期性四肢麻痺の原因遺伝子が骨格筋の電位依存性カルシウムチャネルであることがあきらかにされ、カルシムチャネルの不活性化との関係が示唆された。本研究では電位依存性カルシムチャネルの不活性化機構を分子レベルで解析し心臓不整脈の成因を明らかにすることを目的としている。具体的には低カリウム性周期性四肢麻痺で見つかった異常がヒト低カリウム性周期性四肢麻痺の原因として見つかった変異(アルギニンがヒスチジンに置換)を人工的にウサギL型カルシムチャネルに導入し、異変カルシウムチャネルcDNA(R528HとR1239H)を作製した。このcDNAを先天的にL型カルシウムチャネルを欠くマウス(dysgenic mouse)の培養骨格筋細胞にマイクロインジェクション法により導入し、変異カルシウムチャネルの性質をパッチクランプを用いた電気生理学的方法とFluo3を用いた細胞内カルシウムイオン測定法を用いた同時測定により調べた。その結果、R528HとR1239Hのいずれの変異によってもgating current、カルシウム電流および細胞内カルシウム濃度の増加に変化を認めなかった。変化が認められなかった理由としては、ヒトとウサギの種差によるものかもしれない。また、この変異はチャネルが低カリウム状態におかれたときのみ正常と異なる性質を持つという可能性もある。今後こういった点を検討してみる必要がある。

LONF QT综合征（LQT）是一种遗传性心律不齐，已经报道了电压依赖性钙和钠通道的异常，到目前为止，LQT3是钠通道失活区域的异常。最近还揭示了负责循环四肢瘫痪的基因是骨骼肌中的电压依赖性钙通道，这表明与钙通道失活有关系。这项研究旨在分析分子水平上电压依赖性钙通道失活的机制，并阐明心律不齐的原因。具体而言，在循环四肢腹膜下发现的异常是人为引起人次生环状四肢瘫痪的原因（用组氨酸代替的精氨酸），以人为引入到兔L型钙通道中，以产生奇怪的钙通道CDNAS（R528H和R1239H）。通过微注射将该cDNA引入缺乏L型钙通道的小鼠的培养的骨骼肌细胞中，并使用使用Fluo3使用贴片夹和同时测量的贴片夹和同时测量了突变钙通道的性能。结果，由于R528H或R1239H突变引起的门控电流，钙电流和细胞内钙浓度未观察到任何变化。缺乏变化的原因可能是由于人类和兔子之间的物种差异所致。仅当通道置于降肢状态时，这种突变也可能与正常情况有所不同。将来我们需要考虑这些要点。