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興奮収縮連関の分子機構に関する研究

兴奋-收缩耦合的分子机制研究

基本信息

批准号：
04670073
负责人：
中井淳一
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ジヒドロピリジン受容体とリアノジン受容体(カルシウム放出チャンネル)は骨格筋・心筋における興奮収縮連関の中心的役割を果たすことが知られており、ジヒドロピリジン受容体の分子内繰り返し単位(リピート)IIとIIIの間にある推定細胞内領域が興奮収縮連関において重要であることが明らかされた。本研究ではこれまでの研究をさらに発展させ、リピートIIとIIIの間の領域をさらに詳細に検討し、興奮収縮連関に関与するアミノ酸残基を同定することを目的としている。リピートIIとIIIの間の領域の一部が骨格筋ジヒドロピリジン受容体に由来し、他の部分は心筋ジヒドロピリジン受容体に由来するような6種類のキメラジヒドロピリジン受容体cDNAを遺伝子工学的技術を用いて作成した。そして興奮収縮連関を欠く変異であるmuscular dysgenesisを持つマウスの骨格筋細胞の核にマイクロインジェクション法を用いてキメラ受容体cDNAを導入した。cDNAを導入された骨格筋細胞の電気刺激に対する収縮を検討した結果、導入された6種類のジヒドロピリジン受容体cDNAはいずれも機能的なキメラ受容体を発現していることが明らかになり、興奮収縮連関に関与する領域を漸次限定していくことができた。骨格筋型興奮収縮連関に関与する部位は骨格筋ジヒドロピリジン受容体のリピートIIとIIIの間の領域のほぼ中央に位置する約3分の1の長さの領域で充分であることが明らかになった。この結果をもとに現在、該当する部位のアミノ酸配列から3種類の合成ペプチドを合成中である。

ジヒドロピリジンReceiverとリアジンReceiver(カルシウムreleased チャンネル)はThe core muscles and heart muscles are excited and contracted.ジヒドロピリジン acceptor の molecule 粲り return し sibit (リピート) II と III の room It is presumed that the intracellular domain is related to excitation and contraction and is important. This research is based on the research and development of the research field and the field of research on the research and development of this research In detail, the relationship between excitation and contraction is the same as that of the amino acid residue.リピートIIとIIIの间の区の一部が丝Gigan ジヒドロピリジンReceived body に origin し, his part は心丝ジヒドロピリジThe origin of the acceptor is the 6 types of acceptor cDNA.そしてexcited contraction relatedをowedく変differentであるmuscular Dysgenesis is carried out by using the つマウスのbone lattice cell nucleus にマイクロインジェクション method and the いてキメラ acceptor cDNA is introduced into it. cDNA was introduced into the bone lattice cells and stimulated contraction by electric stimulation. The result was that the cDNA was introduced into the 6 types of cells into the acceptor cDNA. The いずれもfunction of the なキメラ receptor を発appears していることが明らかになり, Excitement and contraction are related to each other and the field is gradually limited. Bone lattice type excitation and contraction connection and する site bone lattice tendon ジヒドロピリジン receptor のリピートIIとIII The center of the field is about 3 minutes long and the field is full. The result of the このをもとに is now, the のアミノ acid compound から 3 types of のるプチドをsynthetic である of the する parts.