DNA二本鎖切断の際に染色体末端で形成されるエンドジョイニング複合体の構造と機能

DNA双链断裂过程中染色体末端形成的末端连接复合物的结构和功能

• 批准号: 10159204
• 负责人: 池田 日出男
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10159204/
• 关键词: DNA二本鎖切断; DNAエンドジョイング; サイレンシング因子; Mrell; Ku抗原; ヒストンアセチル化; クロマチン; テロメア

我々は、DNA二本鎖切断によって形成されるDNA末端のエンドジョイニングの際に形成されるDNA-蛋白質複合体に含まれる因子を探索する目的で解析を行い、ヒストンH4やヒストンアセチル化酵素Nat1-Ard1が、DNAのエンドジョイニングに働き、その機構を通して欠失変異を引き起こす非相同的組換えや修復に関与していることを明らかにした。これらの結果を基にして、DNAの末端が凝縮してヘテロクロマチン様の構造を形成するというモデルを提唱した。さらに、出芽酵母Sgs1ヘリケースが相同的組換えを介して非相同的組換えを抑制することを明らかにした。さらに、出芽酵母Sgs1ヘリケース遺伝子をBLM及びWRNへリケース遺伝子と置き換えた酵母株を作成して、酵母細胞内でのBLM及びWRNヘリケースの働きを調べ、BLM及びWRNヘリケースが酵母において相同的組換えを介して非相同的組換えを抑制することを示した。次に、姉妹染色体をつなぐ役割をするcohesinに関わる因子を明らかにする目的で、分裂酵母Rad21pと相互作用する因子をtwo-hybrid systemを用いて探索した。その結果、分裂酵母の新規遺伝子toil^+を単離した。toil^+遺伝子の解析の結果、toil^+が細胞のM期から間期への移行に必須であることを示した。またtoil^+と遺伝学的に相互作用する遺伝子として分裂酵母のRanGTPaseであるspil^+が単離されたことから、toil^+がRanGTPase systemに働くことが強く示唆された。

I am, the DNA double lock is cut and the DNA end is cut and the DNA end is formed.されるDNA-protein complex contains まれるfactorをExplorationするpurposeでanalyzeを行い、ヒストンH4やヒThe enzyme Nat1-Ard1, DNA enzyme The structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, the structure is different, and the structure is different.これらの Results を base にして, DNA の terminal が condensed し て ヘ テ ロ ク ロ マ チ ン 様 の structure を formation す る と い う モ デ ル を tig sing し た.さらに, budding yeast Sgs1 ヘリケースがThe same group is replaced by えを中して, and the non-identical group is replaced by えを inhibited by することを明らかにした.さらに, budding yeast Sgs1 ヘリケース伝子をBLM and びWRN へリケース伝子とSETきchanged えたyeast strain をmade して, yeast cells でのBLM and びWRNヘリケースの働きを Adjustmentべ, BLM and WRNヘリケースがYeastにおいてThe same group is replaced by えを introduced and してThe non-identical group is replaced by えを suppressed することをshows した. Secondary に, sister chromosome を つ な ぐ 䂒 す る cohesin を わ る factor を 明 ら か に す る purpose で, fission yeast Rad21p と interaction す る factor を two-hybrid system を Exploration し た with いて. The result of その, the new rule of fission yeast の子toil^+を単利した. toil^+ the result of the analysis of the remaining parts, the result of the analysis of the toil^+ the M phase of the cell, the interphase of the cell, and the migration of the cells must be done.またtoil^+と缝学的にinteractionする伝子としてSplit yeastのRanGTPaseであるspil^+が単利されたことから、toil^+がRanGTPase The system is strong and the system is strong.

项目成果

Sato, Y., Shimamoto, A., Shobuike, T., Sugimoto, M., Ikeda, H., Kuroda, S.and Furiichi, Y.: "Cloning and characterization of human Sep1 (hSEP1) gene and cytoplasmic localization of its product." DNA Res.5. 241-246 (1998)

Sato, Y.、Shimamoto, A.、Shobuike, T.、Sugimoto, M.、Ikeda, H.、Kuroda, S. 和 Furiichi, Y.：“人类 Sep1 (hSEP1) 基因的克隆和表征以及细胞质定位

Yamagata,K.,Kato,J.,Shimamoto,A.,Goto,M.,Furuichi,Y.,and Ikeda,H.: "Bloom's and Werner's syndrome genes Suppress hyperrecombination in yeast sgs1 mutant Implication for genomic instability in human diseases." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 95. 8733-8738 (1998)

Yamagata,K.、Kato,J.、Shimamoto,A.、Goto,M.、Furuichi,Y. 和 Ikeda,H.：“布卢姆综合征和沃纳综合征基因抑制酵母 sgs1 突变体中的超重组对人类疾病中基因组不稳定性的影响

Y.Habu,Y.Hisatomi and S.Iida: "Molecular characterization of the mutable flaked allele for flower variegation in the common morning glory." Plant J.16. 371-376 (1998)

Y.Habu、Y.Hisatomi 和 S.Iida：“普通牵牛花中花朵杂色的可变片状等位基因的分子特征。”

Heo,S.-J.,Tatebayashi,K.,Kato,J.,and Ikeda,H.: "Budding yeast RHC21 gene,a homologue of fission yeast rad21^+ gene,is essential for chromosome segregation." Mol.Gen.Genet.257. 149-156 (1998)

Heo,S.-J.、Tatebayashi,K.、Kato,J. 和 Ikeda,H.：“出芽酵母 RHC21 基因是裂殖酵母 rad21^ 基因的同源物，对于染色体分离至关重要。”

A.Hasebe,S.Tsushima and S.Iida: "Isolation and characterization of IS1416 from Pseudomonas glumae,an new member of the IS3 family" Plasmid. 39. 196-204 (1998)

A.Hasebe、S.Tsushima 和 S.Iida：“IS3 家族新成员——荚膜假单胞菌中 IS1416 的分离和表征”质粒。