分裂酵母rad21^+遺伝子産物の核構造維持と染色体分配に関する機能の解析

裂殖酵母rad21^+基因产物维持核结构和染色体分离的功能分析

• 批准号: 08274203
• 负责人: 池田 日出男
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08274203/
• 关键词: 分裂酵母; rad21^+遺伝子; 染色体分配; 微小管; DNA修復; 20Sサイクロソーム; ユビキチン依存性蛋白質分解; チューブリン

分裂酵母のrad21^+遺伝子は、DNAの二重鎖切断修復と細胞増殖に必須な遺伝子である。rad21^+遺伝子の生育に必須な機能を明らかにするため、我々はrad21温度感受性株(rad21-k1)を単離し、その解析を行った。その結果、rad21-k1株では、制限温度下で、短い微小管と凝縮した染色体をもつ細胞や、姉妹染色体が完全に分離せずに微小管によって引き伸ばされたり不均一に分配された細胞が出現し、さらにcut様の細胞や核が細胞の片側にdisplaceしたものが観察された。したがって、rad21^<1+>遺伝子産物は、特に分裂期の中期から後期において、染色体の正常な分配に必要であると考えられる。またこの変異株は、許容温度でUVやγ線に感受性を示すが、チューブリンの重合阻害剤であるthiabendazoleに対しても感受性を示し、またα-チューブリンの低温感受性変異nda2-KM52と合成致死になることなどから、rad21^+遺伝子産物は微小管に関わる機能も有することが分かった。さらにFACScanの解析から、rad21-K1株では、制限温度下でDNA複製は正常に起こっているが、許容温度においてDNA合成を阻害するhydroxyurea存在下、その生育は野生株に比べて阻害されたことから、DNA複製もしくはそのチェックポイントに何らかの関与があると思われる。興味深いことに、rad21-K1変異は、20Sサイクロソームを構成するCut9をコードするcut9^+遺伝子の変異とも合成致死性を示した。20Sサイクロソームはユビキチンリガーゼ活性をもち、サイクリン分解や分裂中期/後期遷移に必須である。rad21^+とcut9^+との遺伝的相互作用から、rad21^+遺伝子産物がユビキチン依存性蛋白質分解の経路を通じ、多様な細胞機能を果たしている可能性が考えられる。

Dividing yeast rad21^+ gene, DNA double lock cut repair and cell proliferation must be gene. Rad21^+ Genetics must be able to function as a plant with temperature sensitivity (rad21-k1). As a result, in the rad21-k1 strain, at the limiting temperature, short microtubules and condensed chromosomes were found in the cells, and the chromosomes were completely separated within six minutes. The cells were unevenly distributed, and the cut-like cells and nuclei were dislocated on the side of the cells. The results of the study indicate that the chromosome distribution is essential for the development of the chromosome. The sensitivity to UV and gamma rays is indicated by the sensitivity to UV and gamma rays. The sensitivity to low temperatures is indicated by the sensitivity to alpha rays. The sensitivity to low temperatures is indicated by the sensitivity to alpha rays. The sensitivity to low temperatures is indicated by the sensitivity to alpha rays. The sensitivity to low temperatures is indicated by the sensitivity to alpha rays. The sensitivity to low temperatures is indicated by the sensitivity to gamma rays. The sensitivity to low temperatures is indicated by the sensitivity to alpha rays. The sensitivity to low temperatures is indicated by the sensitivity to alpha rays. The sensitivity to low temperatures is indicated by the sensitivity to alpha rays. The sensitivity to low temperatures is indicated by the sensitivity to low temperatures. The sensitivity to low temperatures is indicated by the sensitivity to alpha rays. The sensitivity to low temperatures is indicated by the sensitivity to low temperatures. The sensitivity to low temperatures. The sensitivity to low temperatures is indicated by the sensitivity to high temperatures. The sensitivity to low temperatures. FACScan analysis, rad21-K1 strain, at limiting temperature, DNA replication is normal, at limiting temperature, DNA synthesis is inhibited, in the presence of hydroxyurea, DNA replication is inhibited, and DNA replication is inhibited, compared to wild strains. Happyness, Rad21-K1, Rad 20, Rad21-K1, Rad 20, Rad 21-K1, Rad 21-K1, Rad 21, Rad 21-K1, Rad 21, Rad 21-K1, Rad 20, Rad 21, Rad 2 20S Rad21^+, cut9^+ and gene interaction, rad21^+ and gene products, dependent protein decomposition pathway, multiple cell functions, and the possibility of such effects

项目成果

Nohmi,T.: "New transgenic mouse mutagenesis test system using Spi^- and 6-thioguianine selections." Env.Mol.Mutagenesis. (in press). (1997)

Nohmi,T.：“使用 Spi^- 和 6-硫鸟嘌呤选择的新型转基因小鼠诱变测试系统。”

Ukita,T.: "Role of the recJ gene product in UV-induced illegitimate recombination at the hotspot." J.Bacteriol.178. 2362-2367 (1996)

Ukita,T.：“recJ 基因产物在紫外线诱导的热点非法重组中的作用。”

Tsukamoto,Y.: "Effects of mutations of RAD50,RAD51,and RAD52,and related genes on illegitimate recombination in Saccharomyces cerevisiae" Genetics. 142. 383-391 (1996)

Tsukamoto,Y.：“RAD50、RAD51 和 RAD52 以及相关基因突变对酿酒酵母非法重组的影响”遗传学。

Kumagai,Y.: "Quinolone-resistant mutants of Escherichia coli DNA topoisomerase IV parC gene." Antimicrob.Agents Chemother.40. 710-714 (1996)

Kumagai,Y.：“大肠杆菌 DNA 拓扑异构酶 IV parC 基因的喹诺酮抗性突变体。”

Yokochi,T.: "DNA nicking by Escherichia coli topoisomerase IV with a substitution mutation from tyrosine to histidine at the active site." Genes to Cells. (in press). (1997)

Yokochi,T.：“大肠杆菌拓扑异构酶 IV 造成的 DNA 切口，活性位点从酪氨酸替换为组氨酸。”