多剤耐性HIV-1の出現機構

多重耐药HIV-1的出现机制

• 批准号: 10180227
• 负责人: 加藤 真吾
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10180227/
• 关键词: HIV-1; 薬剤耐性; 遺伝型; 血中薬剤濃度; 多剤併用療法; 血漿RNA; プロウイルス; 耐性検査

薬剤耐性HIV-1の出現は多剤併用療法失敗の主要な原因の一つとなっている。したがって、HIV-1の多剤耐性獲得の機構を明らかにすることは、抗HIV-1治療の成績を向上させるために重要な課題である。本研究では、血中薬剤濃度と薬剤耐性HIV-1出現との関連性について検討した。対象は、慶應義塾大学病院特殊感染症クリニックに外来受診中のHIV-1感染者2例(C5とC13)であった。HIV-1 env遺伝子V3領域を含む327塩基対の塩基配列を決定し、サブタイプAからHの参照配列を用いて系統樹分析を行った結果、C5のサブタイプはA、C13のサブタイプはBであった。C5はネルフィナビル、AZT.ddCの投与を受け、C13はネルフィナビル、MT、3TCの投与を受けた。治療開始前のCD4細胞数は、C5では138細胞/mlで治療開始後も漸減傾向であった。C13では505細胞/mlで治療開始後も同じく漸減傾向であった。治療開始前の血漿HIV-1 RNA濃度は、C5では2,800コピー/mlで、治療開始後17ヶ月まで検出限界以下であった(サブタイプAに特異的なプライマーを用いて測定した)。C13では60,000コピー/mlで、治療開始後一旦検出限界以下になったが、3ヶ月後から徐々に上昇し、6ヶ月後には10,000のオーダーになった。両症例の血中ネルフィナビル濃度をHPLCによって測定した結果、C5は投与4時間後で2000ng/ml、8時間後で832ng/ml、C13は投与12.5時間後で1240ng/mlであった。クリアランス率を考慮すると、C13の方がC5よりも、血中ネルフィナビル濃度が4倍程度高いと考えられる。C5とC13のそれぞれプロウイルスと血漿ビリオンのプロテアーゼコーディング領域をnested PCRで増幅し塩基配列を決定した結果、C5では治療開始後17ヶ月までネルフィナビル耐性を示すアミノ酸置換は検出されなかったが、C13では治療開始後7ヶ月からネルフィナビル耐性を示すD30Nのアミノ酸置換が検出された。すなわち、当初の予想とは反して、血中ネルフィナビル濃度の高いC13のHIV-1の方が先に薬剤耐性を獲得した。治療開始前の血漿HIV-1 RNA濃度はC13の方が高かったことが薬剤耐性HIV-1の出現とより関係している可能性がある。本研究の結果、薬剤耐性HIV-1出現の容易さは血中薬剤濃度だけでは必ずしも決まらず、HIV-1の複製能やサブタイプなどの様々な要因を考えなければならないことが示唆された。

The main な reason for the failure of <s:1> multi-drug combination therapy in drug-resistant HIV-1 <s:1> is となって となって となって る る る る る る る る る る る る し た が っ て, HIV - 1 の tonic more patience. の institutions を Ming ら か に す る こ と は, HIV - 1 treatment の achievements を upward さ せ る た め に important topic な で あ る. In this study, で で, the concentration of drugs in the blood と, drug-resistant HIV-1, と <s:1> association, に て検 て検 て検 て検 explore た た. Like は seaborne, keio university hospital special adapting just-in-time inventory ク リ ニ ッ ク に foreign diagnosis の HIV - 1 infection in 2 cases (C5 と C13) で あ っ た. Traces of HIV - 1 env 伝 son V3 field contains を む 327 salt base の seaborne salt base with を decided し, サ ブ タ イ プ A か ら H の reference to match by い を を line っ て system tree analysis た results, C5 の サ ブ タ イ プ は A and C13 の サ ブ タ イ プ は B で あ っ た. C5 は ネ ル フ ィ ナ ビ ル, AZT. Cast with ddC の を け, C13 は ネ ル フ ィ ナ ビ ル, MT, 3 tc の cast with を け た. Before the start of treatment, the CD4 cell count of <s:1> and C5で で 138 cells /mlで tended to gradually decrease after the start of treatment であった. C13で で 505 cells /mlで after the start of treatment, the で and じく gradually decrease the tendency であった. Treatment prior to the start of the RNA concentration は の plasma HIV - 1, C5 で は 2800 コ ピ ー / ml で, ヶ 17 months after the start of treatment ま で 検 out limits the following で あ っ た (サ ブ タ イ プ A に specific な プ ラ イ マ ー を with い て determination し た). C13 で は 60000 コ ピ ー / ml で, once after treatment began to 検 limit the following に な っ た ヶ が and 3 month after か ら xu 々 に rise し, 6 ヶ months に は 10000 の オ ー ダ ー に な っ た. Cases that struck a の blood ネ ル フ ィ ナ ビ ル concentration を HPLC に よ っ て determination し た results, C5 は with four で 2000 ng/ml, 8 time after time after で 832 ng/ml, C13 は and 12.5 time で 1240 ng/ml で あ っ た. ク リ ア ラ ン ス rate を consider す る と, C13 の party が C5 よ り も, blood ネ ル フ ィ ナ ビ ル high degree of concentration 4 times が い と exam え ら れ る. C5 と C13 の そ れ ぞ れ プ ロ ウ イ ル ス と plasma ビ リ オ ン の プ ロ テ ア ー ゼ コ ー デ ィ ン グ field を nested PCR で rights of し salt base with column を decided し た results, C5 で は ヶ 17 months after the start of treatment ま で ネ ル フ ィ ナ ビ ル patience を shown す ア ミ ノ acid replacement は 検 out さ れ な か っ た が, C13 で は ヶ seven months after the start of treatment か ら ネ ル フ ィ ナ ビ ル patience を shown す D30N の ア ミ ノ acid replacement が 検 out さ れ た. の to す な わ ち, thinking と は anti し て, blood ネ ル フ ィ ナ ビ ル high concentration の い C13 の の HIV - 1 square が に first 薬 tonic patience を get し た. RNA の plasma HIV - 1 before the start of treatment concentration は C13 の party が high か っ た こ と が 薬 tonic patience の appear と HIV - 1 よ り masato is し て い る possibility が あ る. の results of this research, 薬 tonic patience in HIV - 1 の easy さ は 薬 in blood tonic concentration だ け で は will ず し も definitely ま ら ず の, HIV - 1 copy to や サ ブ タ イ プ な ど の others 々 な by を exam え な け れ ば な ら な い こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

加藤真吾: "HIVの薬剤感受性試験" 血液:免疫・腫瘍. 3(3). 67-73 (1998)

Shingo Kato：“HIV 药物敏感性测试”血液：免疫学/肿瘤 3(3) (1998)。

Kato, S.et al.: "A plaque hybridization assay for quantifying and cloning infections human immunodeficiency virus type 1 virions" J.Virol.Methods. 72(1). 1-7 (1998)

Kato, S.et al.：“用于定量和克隆人类免疫缺陷病毒 1 型病毒体感染的噬菌斑杂交测定”J.Virol.Methods。

Negishi, M.et al.: "An HIV Autopy-Characterization of Zidovudine-resistant Subtype E HIV-1 from Autopsy Tissue Suggests the Route of Infection and an Alternative Therapy" Keio J.Med.48(1). 44-52 (1999)

Negishi, M.等人：“尸检组织中齐多夫定耐药 E 亚型 HIV-1 的 HIV 尸检表征表明感染途径和替代疗法”Keio J.Med.48(1)。