造血細胞の遺伝子操作

造血细胞的基因操作

• 批准号: 10181105
• 负责人: 小澤 敬也
• 金额: $ 101.82万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10181105/
• 关键词: 遺伝子治療; 造血幹細胞; 選択的増幅遺伝子; コモンマーモセット; レトロウイルスベクター; 突然変異マウス; サイトカインレセプター; トランスポゾンシステム; コンディショナルターゲティング; サイトカイン; V-J組換え; 発作性夜間血色素尿症(PNH); ジーンターゲティング; ケモカイン; クローン優位性

体細胞あるいは生殖系列細胞の遺伝子操作を軸とした造血システムの研究を行った。[造血幹細胞の直接的遺伝子操作] 1. 遺伝子導入造血幹細胞の選択的増幅システムの開発(小澤):新しいタイプの選択的増幅遺伝子として、分子スイッチにエリスロポエチン受容体を用いるものを開発し、従来型より効率が良いことを確認した。 2. 小型霊長類造血幹細胞の特徴化と遺伝子導入(谷):抗コモンマーモセットCD34単クローン抗体をクローン化した。GFP発現HIV(VSV)シュードタイプレンチウィルスベクターを用いて、コモンマーモセットCD34陽性細胞に遺伝子導入し、NOD/SCIDマウスへの移植実験を行った。 3. 幹細胞への効率の良い遺伝子導入法の開発(北村):ネコ内因性レトロウイルスRD114のenvを利用した新しいパッケイジング細胞PLAT-Fを樹立した。この系で作製したウイルスベクターで臍帯血由来造血細胞に遺伝子導入し、NOD/SCIDマウスへの移植実験を行った。[発生工学的アプローチによる造血システムの解析] 1. 発生工学的手法を用いた造血・血管系システムの解析(吉田):リンパ浮腫を呈する突然変異マウスにおける血管からリンパ管への血流の移行に関して、小腸粘膜絨毛の毛細血管から中心リンパ管への移行に端を発している可能性が高いことが判明した。 2. IL-7Rのリンパ球増殖・分化シグナル(生田):IL-7レセプターのシグナル伝達分子のSTAT5が5'Jg1プロモーター領域に転写共役因子をリクルートし、ヒストンのアセチル化を介してTCRγ遺伝子座のクロマチン構造変換を促し、転写とDNA組換えを誘導することを示した。 3. マウストランスポゾンシステムを利用した造血系新規遺伝子の探索(竹田):個体内で効率よく移動するマウストランスポゾンを利用して網羅的遺伝子機能解析システムの樹立を推進した。

Somatic cells, reproductive cells, genetic manipulation, and hematopoietic system research Hematopoietic stem cells are the most common type of stem cells. Development of a new type of stem cell selection system (Ozawa) 2. Characterization and Gene Introduction of Small Hematopoietic Stem Cells (Valley): Anti-CD34 Antibody Characterization GFP develops HIV(VSV) gene expression in CD34-positive cells, and NOD/SCID gene expression and transplantation. 3. Development of a method for the introduction of stem cells into cells (Kitamura): the use of env in the generation of stem cells and the establishment of PLAT-F in cells. This is the first time that we've had a successful transplant of hematopoietic cells derived from umbilical cord blood. [Analysis of Hematopoiesis System of Evolution Engineering] 1. Analysis of Hematopoiesis and Vascular System (Yoshida): It is highly probable that the blood vessels of the small intestine mucosa villi will migrate from the center of the blood vessels to the end of the blood vessels due to sudden changes in edema. 2. IL-7R gene expression and differentiation:IL-7R gene expression and differentiation in STAT5, 5'Jg1, 5'Jg1, 6 'Jg1, 6' Jg 1, 6 3. The development of new gene in hematopoietic system

项目成果

Urabe,M.: "Charged-to-alanine scanning mutagenesis of N-terminal half of adeno-associated virus type 2 Rep78 protein" J.Virol.(in press).

Urabe,M.：“腺相关病毒 2 型 Rep78 蛋白 N 末端一半的电荷转丙氨酸扫描诱变”J.Virol.（出版中）。

Mori, M.: "Antitumor effect of beta2-microglobulin in leukemic cell-bearing mice via apoptosis-inducing activity : activation of caspase-3 and nuclear factor-kappaB"Cancer Res.. 61. 4414-4417 (2001)

Mori, M.：“β2-微球蛋白通过细胞凋亡诱导活性对白血病细胞小鼠的抗肿瘤作用：caspase-3 和核因子-kappaB 的激活”Cancer Res.. 61. 4414-4417 (2001)

Duda, D.G.: "Overexpression of the p53-induced brain angiogenesis inhibitor 1 suppresses efficiently tumor angiogenesis"Br.J.Cancer. (in press).

Duda, D.G.：“p53 诱导的脑血管生成抑制剂 1 的过度表达可有效抑制肿瘤血管生成”Br.J.Cancer。

Honke, K.: "Paranodal junction formation and spermatogenesis require sulfoglycolipids"Proc.Natl.Acad.Sci.USA. (in press).

Honke, K.：“节点旁连接形成和精子发生需要磺基糖脂”Proc.Natl.Acad.Sci.USA。

Horie, K.: "Efficient chromosomal transposition of a Tc1/mariner-like transposon Sleeping Beauty in mice"Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 98. 9191-9196 (2001)

Horie, K.：“小鼠中 Tc1/水手样转座子睡美人的高效染色体转座”Proc.Natl.Acad.Sci.USA。