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細胞質分裂期におけるリン酸化ミオシンIIの役割解明に関する研究

磷酸化肌球蛋白II在胞质分裂过程中的作用研究

基本信息

批准号：
10213206
负责人：
細谷浩史
金额：
$ 33.09万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (B)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞分裂期におけるミオシンリン酸化の役割解明を目的として、ヒーラ細胞を実験材料に使用して以下の成果を得た。1.19Serがリン酸化されたミオシン調節軽鎖を特異的に認識するモノクローナル抗体を作製した。2.18Thrおよび19Serの2ケ所が2重リン酸化されたミオシン調節軽鎖を特異的に認識するモノクローナル抗体を作成した。3.これらの抗体を用いて、間期および分裂期のヒーラ細胞を染色したところ、間期の細胞ではストレスファイバーが染色され、分裂期の細胞では収縮環の領域が染色されることが明らかになった。4.2重リン酸化ミオシンに対する抗体およびミオシン重鎖の抗体を用いて分裂期の細胞を2重染色したところ、収縮環領域では、前者はdisc状に染色像が観察されたが、後者の染色像はリング状であることが明らかになった。これらの結果から、収縮環でミオシン重鎖と軽鎖が必ずしも共局在しないという事実が明らかにされた。5.ミオシン調節軽鎖のリン酸化部位に関する変異体を作成しヒーラ細胞への導入を行ったところ、18Thrおよび19Serにアスパラギン酸を導入した疑似2重リン酸化ミオシン調節軽鎖を導入した細胞では、細胞分裂の阻害は特に観察されないが、これらの変異ミオシン調節軽鎖は収縮環領域に局在することが明らかにされた。19Serにアスパラギン酸を導入した疑似1重リン酸化ミオシン調節軽鎖の場合でも同様の結果が観察されたが、収縮環への局在は前者ほど顕著ではなかった。また野生型ミオシン調節軽鎖を導入した場合では、収縮環への局在は顕著に観察されなかった。

The following results have been obtained from the use of cell division materials: 1.19Ser is a protein that regulates the activity of antibodies in specific tissues. 2.18Thr and 19Ser are the two most important factors in the development of anti-tumor antibodies. 3. Antibodies were used in the middle, interphase, and mitotic phases of the cells to stain, interphase, and mitotic phases of the cells to stain, and mitotic phases of the cells to stain. 4.2 In addition, the antibody was used to re-stain the cells in the division stage. The former was disc-like and the latter was disc-like. The result of this is that the lock must be closed. 5. The regulation of cell division and the regulation of cell division. 19Ser. p. p. p. The wild-type gene regulator was introduced into the system, and the gene regulator was detected.