造血幹細胞複製因子の同定・単離とその実用化

造血干细胞复制因子的鉴定分离及其实际应用

• 批准号: 10877155
• 负责人: 平井 久丸
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877155/
• 关键词: 造血幹細胞; Notch; 骨髄系前駆細胞; 赤芽球系細胞; 転写因子; GATA-2; 分化; 幹細胞増幅; 骨髄支持細胞; Notchl; 赤芽球系前駆細胞

これまでに多くの造血因子が同定・単離されたが、いずれも多能性造血幹細胞を増やすものではなく、ある程度分化した幹細胞を増殖させるとともに分化を促進する因子である。Notchは細胞内領域のみに切断されることにより、ligand非依存性の活性化型Notch(aNotch)となるが、このaNotchが造血幹細胞を増幅できる可能性が考えられている。myeloid系の分化モデルとして、マウス骨髄系前駆細胞株である32DのG-CSFによる好中球への分化を、erythroid系の分化モデルとしてマウスフレンド赤白血病細胞株F5-5のDMSO及びactivinによる赤芽球系細胞への分化を用い、aNotch1の分化に対する影響を調べた。その結果、aNotch1により、それらの分化は抑制されることが示された。さらに、分化抑制効果がどの段階で働いているかを調べるため、32DおよびF5-5を用いて、myeloid specificな転写因子としてはC/EBPα,C/EBPε,PU.1,AML1b,c-myb,GATA-2について、erythroid specificな転写因子としてはSCL,GATA-1,GATA-2,NF-E2(p45),MafK(p18),EKLF,c-mybについて分化刺激の前後での発現量を比較した。その結果、分化刺激により活性化型Notch1発現細胞およびコントロール細胞の両者において、これらのlineage specificな転写因子は同様の発現パターンを示した。しかし、GATA-2は活性化型Notch1発現細胞でのみ分化刺激後も発現が維持されており、Notch1による分化抑制効果が、GATA-2を介している可能性が示唆された。

These factors promote the proliferation and differentiation of pluripotent hematopoietic stem cells Notch is an intracellular domain that is not dependent on ligand-activated Notch(aNotch) and is not dependent on hematopoietic stem cells. Effects of DMSO and activin on differentiation of myeloid lineage, erythroid lineage, erythroid lineage and aNotch1 in leukemia cell line F5-5 The result of this is that the Notch 1 is the most important part of the game. In addition, differentiation inhibition effects were modulated by C/EBPα,C/EBP ε,PU.1, AML1b,c-myb,GATA-2, erythroid specific factors, SCL,GATA-1,GATA-2,NF-E2(p45),MafK(p18),EKLF, c-myb, and myeloid-specific factors before and after differentiation stimulation. As a result of differentiation stimulation, activated Notch1 cells are shown to be lineage-specific and to be able to express the same gene. The possibility that GATA-2 might be involved in the differentiation inhibition of Notch1 cells after stimulation of Notch1 differentiation was also discussed.

项目成果

Ueno H: "Association of IRS proteins with Bcl-2 and their effects on its phosphorylation and anti-apoptotic function"Mol. Biol. Cell. (In press).

Ueno H：“IRS 蛋白与 Bcl-2 的关联及其对其磷酸化和抗凋亡功能的影响”Mol。

Nakamoto T: "CIZ : a zinc finger protein that interacts with p130cas and activates the expression of matrix metalloproteinases"Mol. Cell. Biol.. (In press).

Nakamoto T：“CIZ：一种锌指蛋白，与 p130cas 相互作用并激活基质金属蛋白酶的表达”Mol。

Shimizu K: "Mouse Jagged1 physically interacts with Notch2 and other Notch receptors : assessment by quantitative methods."J Biol Chem. 274. 32961-32969 (1999)

Shimizu K：“小鼠 Jagged1 与 Notch2 和其他 Notch 受体发生物理相互作用：通过定量方法进行评估。”J Biol Chem。

Kurokawa M: "The t (3 ; 21) fusion product, AML1/Evi-1, interacts with Smad3 and blocks TGFβ-mediated growth inhibition of myeloid cells." Blood. 92. 4003-4012 (1998)

Kurokawa M：“t (3; 21) 融合产物 AML1/Evi-1 与 Smad3 相互作用并阻断 TGFβ 介导的骨髓细胞生长抑制。” Blood。

Tanaka K: "The AML1/ETO (MTG8) and AML1/Evi-1 leukemia-associated chimeric oncoproteins accumulate PEBP2β (CBFβ) in the nucleus more efficiently than wild-type AML1." Blood. 91. 1688-1699 (1998)

Tanaka K：“AML1/ETO (MTG8) 和 AML1/Evi-1 白血病相关嵌合癌蛋白比野生型 AML1 更有效地在细胞核中积累 PEBP2β (CBFβ)。” 91. 1688-1699 (1998)