权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Notchリガンドを利用した造血幹細胞の増幅とその実用化

Notch配体扩增造血干细胞及其实际应用

基本信息

批准号：
12877156
负责人：
平井久丸
金额：
$ 1.22万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877156/
关键词：
Notch 造血幹細造血発生 1次造血 2次造血 HES-1 paraaortic splanchnopleures yalk sac Notchシグナル Notchリガンド GATA-2 造血幹細胞 ES細胞造血幹細胞増幅活性化型Notch1 RAS MAPKシグナル

项目摘要

Notchは細胞の分化を抑制するシグナルを伝達するため、造血幹細胞の未熟性を維持したまま体外で増幅する技術の開発に役立つ可能性がある。本年度は、Notchの造血発生における役割を検討し、Notchシグナルによる造血幹細胞の体外増幅の可能'性を検討することを目的とした。胎生9.5日のNotch1ノックアウトマウスよりparaaortic splanchnopleures(P-Sp)およびyalk sac(YS)を採取し、組織培養による造血細胞の発生、P-SpおよびYS形成細胞によるコロニー形成能と同系マウス造血再構築能を検討した。N1+/-マウスのP-Spより血管内皮細胞は形成されたが、造血細胞は形成されなかった。また、野生型またはN1+/-マウスのYS細胞は、新生児マウスに移植することにより造血を再構築したが、N1+/-マウスのYS細胞は再構築しなかった。しかし、N1+/-マウスYS細胞は、血球コロニー形成能が保たれていた。したがって、Notch1はYSにおける造血前駆細胞の発生(1次造血)には必要でなく、2次造血、特に血管内皮・造血幹細胞共通の前駆細胞が、造血構築能を獲得する過程に必須であると推測された。Notchシグナル分子であるHES-1を、レトロウィルスベクター一によりマウス骨髄造血幹細胞分画(Lin-Scal+c-Kit+CD34-)に導入し、これを放射線照射同系マウスに移植することにより、造血幹細胞が試験管内およびレシピエントマウス個体内でコントールに比べ、より維持されるか否かを検討した。HES-1導入造血幹細胞は試験管内で2日間、および移植されたマウス個体で3ヶ月、コントロール細胞に比較して長く維持され、全ての系統の造血細胞を再構築した。したがって、HES-1シグナルは造血幹綱胞の体外増幅に有崩と考えられた。

Notch cell differentiation inhibitor, hematopoietic stem cell The possibility of maintaining the immature nature of the in vitro and increasing width of the technology is also possible. This year, Notch's hematopoietic stem cells have been cut and raised, and Notch's hematopoietic stem cells have been expanded in vitro. Birth day 9.5のNotch1ノックアウトマウスよりparaaortic splanchnopleures(P-Sp)およびyalk sac(YS) is collected, tissue culture is used to produce hematopoietic cells, P-Sp is used to form YS cells, and it is able to form cells and is homologous to produce hematopoietic reconstituted cells. N1+/-マウスのP-SpよりThe vascular endothelial cells are formed and the hematopoietic cells are formed.また, wild type またはN1+/-マウスのYS cell は, new born または transplanted することによりHematopoietic を Reconstruction したが, N1+/- マウスのYS cells は Reconstruction しなかった.しかし、N1+/-マウスYS cells は、blood cell コロニー formation energy が宝たれていた.したがって、Notch1はYSにおけるThe growth of hematopoietic cells before hematopoiesis (1st hematopoiesis) にはNecessary でなく、2nd hematopoiesis , the characteristic progenitor cells and hematopoietic stem cells that are common to vascular endothelium and hematopoietic stem cells are necessary to obtain the ability of hematopoietic structures, and it is necessary to speculate. Notch シグナルmolecule であるHES-1を, レトロウィルスベクター一によりマIntroduction of hematopoietic stem cell isolation (Lin-Scal+c-Kit+CD34-)これをradiation irradiation syngeneic masu transplantation することにより, hematopoietic stem cell test tube およびレシピエントマウスIndividual でコントールに比べ, よりmaintain されるか不かを検した. HES-1 is introduced into the hematopoietic stem cells in the test tube on the 2nd day, and the transplantation is carried out individually on the 3rd day. The month, the comparison of コントロール cells, the growth and maintenance of され, and the reconstruction of hematopoietic cells of the whole ての system. Hematopoietic stem cells and HES-1 hematopoietic stem cells were amplified in vitro and tested.