Notchリガンドを利用した造血幹細胞の増幅とその実用化

Notch配体扩增造血干细胞及其实际应用

基本信息

  • 批准号:
    12877156
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.22万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    2000
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2000 至 2001
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

Notchは細胞の分化を抑制するシグナルを伝達するため、造血幹細胞の未熟性を維持したまま体外で増幅する技術の開発に役立つ可能性がある。本年度は、Notchの造血発生における役割を検討し、Notchシグナルによる造血幹細胞の体外増幅の可能'性を検討することを目的とした。胎生9.5日のNotch1ノックアウトマウスよりparaaortic splanchnopleures(P-Sp)およびyalk sac(YS)を採取し、組織培養による造血細胞の発生、P-SpおよびYS形成細胞によるコロニー形成能と同系マウス造血再構築能を検討した。N1+/-マウスのP-Spより血管内皮細胞は形成されたが、造血細胞は形成されなかった。また、野生型またはN1+/-マウスのYS細胞は、新生児マウスに移植することにより造血を再構築したが、N1+/-マウスのYS細胞は再構築しなかった。しかし、N1+/-マウスYS細胞は、血球コロニー形成能が保たれていた。したがって、Notch1はYSにおける造血前駆細胞の発生(1次造血)には必要でなく、2次造血、特に血管内皮・造血幹細胞共通の前駆細胞が、造血構築能を獲得する過程に必須であると推測された。Notchシグナル分子であるHES-1を、レトロウィルスベクター一によりマウス骨髄造血幹細胞分画(Lin-Scal+c-Kit+CD34-)に導入し、これを放射線照射同系マウスに移植することにより、造血幹細胞が試験管内およびレシピエントマウス個体内でコントールに比べ、より維持されるか否かを検討した。HES-1導入造血幹細胞は試験管内で2日間、および移植されたマウス個体で3ヶ月、コントロール細胞に比較して長く維持され、全ての系統の造血細胞を再構築した。したがって、HES-1シグナルは造血幹綱胞の体外増幅に有崩と考えられた。
Notch cell differentiation inhibitor, hematopoietic stem cell The possibility of maintaining the immature nature of the in vitro and increasing width of the technology is also possible. This year, Notch's hematopoietic stem cells have been cut and raised, and Notch's hematopoietic stem cells have been expanded in vitro. Birth day 9.5のNotch1ノックアウトマウスよりparaaortic splanchnopleures(P-Sp)およびyalk sac(YS) is collected, tissue culture is used to produce hematopoietic cells, P-Sp is used to form YS cells, and it is able to form cells and is homologous to produce hematopoietic reconstituted cells. N1+/-マウスのP-SpよりThe vascular endothelial cells are formed and the hematopoietic cells are formed.また, wild type またはN1+/-マウスのYS cell は, new born または transplanted することによりHematopoietic を Reconstruction したが, N1+/- マウスのYS cells は Reconstruction しなかった.しかし、N1+/-マウスYS cells は、blood cell コロニー formation energy が宝たれていた.したがって、Notch1はYSにおけるThe growth of hematopoietic cells before hematopoiesis (1st hematopoiesis) にはNecessary でなく、2nd hematopoiesis , the characteristic progenitor cells and hematopoietic stem cells that are common to vascular endothelium and hematopoietic stem cells are necessary to obtain the ability of hematopoietic structures, and it is necessary to speculate. Notch シグナルmolecule であるHES-1を, レトロウィルスベクター一によりマIntroduction of hematopoietic stem cell isolation (Lin-Scal+c-Kit+CD34-)これをradiation irradiation syngeneic masu transplantation することにより, hematopoietic stem cell test tube およびレシピエントマウスIndividual でコントールに比べ, よりmaintain されるか不かを検した. HES-1 is introduced into the hematopoietic stem cells in the test tube on the 2nd day, and the transplantation is carried out individually on the 3rd day. The month, the comparison of コントロール cells, the growth and maintenance of され, and the reconstruction of hematopoietic cells of the whole ての system. Hematopoietic stem cells and HES-1 hematopoietic stem cells were amplified in vitro and tested.

项目成果

期刊论文数量(12)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Izutsu K: "The corepressor CtBP interacts with Evi-1 to repress TGF-β signaling"Blood. 97. 2815-2822 (2001)
Izutsu K:“辅阻遏物 CtBP 与 Evi-1 相互作用,抑制 TGF-β 信号传导”Blood. 97. 2815-2822 (2001)
  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Shimizu K: "Manic fringe and lunatic fringe modify different sites of the Notch2 extrancellular region, resulting in different signaling modulation"J. Biol. Chem.. 276. 25753-25758 (2001)
Shimizu K:“Manic fringe 和 lunatic fringe 修饰了 Notch2 细胞外区域的不同位点,导致不同的信号调节”J.
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Shimizu K: "Binding of Deltal, Jagged1, and Jagged2 to Notch2 rapidly induces cleavage, nuclear translocation and hyperphosphorylation of Notch2."Mol.Cell.Biol.. 20. 6913-6922 (2000)
Shimizu K:“Delta、Jagged1 和 Jagged2 与 Notch2 的结合可快速诱导 Notch2 的裂解、核易位和过度磷酸化。”Mol.Cell.Biol.. 20. 6913-6922 (2000)
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Yasukawa M: "HLA class II-restricted antigen presentation of endogenous bcr-abl fusion protein by chronic myelohenous leukemia-derived dendritic cells to CD4+T lymphocytes"Blood. 98. 1498-1505 (2001)
Yasukawa M:“慢性粒细胞白血病衍生树突状细胞将内源性 bcr-abl 融合蛋白 HLA II 类限制性抗原呈递至 CD4 T 淋巴细胞”血液。
  • DOI:
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  • 作者:
  • 通讯作者:
Ueno H: "Association of IRS proteins with Bcl-2 and their effects on its phosphorylation and anti-apoptotic function."Mol.Biol.Cell. 11. 735-746 (2000)
Ueno H:“IRS 蛋白与 Bcl-2 的关联及其对其磷酸化和抗凋亡功能的影响。”Mol.Biol.Cell。
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