ヒト白血病の遺伝子診断

人类白血病的基因诊断

• 批准号: 02262209
• 负责人: 平井 久丸
• 金额: $ 6.4万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02262209/
• 关键词: 白血病; ras遺伝子; ABL遺伝子; p53遺伝子; RTーPCR法; SSCP法

ras遺伝子は1塩基の点突然変異によって活性化を受ける。このためこの領域を含む部分をRTーPCR法によって増幅し、オリゴヌクレオチド・プロ-ブを用いてDifferential hybridizationを行った。その結果,MDS症例90例中13例にNーras遺伝子の活性化が検出され,その後の経過観察の結果,この13例中11例が白血病へ移行した。ras遺伝子が正常であった例で経過を追うことのできたMDS症例においては白血化がほとんど見られないことから,ras遺伝子の活性化はMDSの白血化に対する重要な予後判定因子であると結論された。Ph^1陽性CMLおよびPh^1陽性ALLにおけるt(9;22)におけるBCR遺伝子上の切断点を検討するため、検体よりRNAを抽出しRTーPCR法を用いて解析を行った。Ph^1陽性CMLにおいては全例でMーbcr領域に切断点が検出されたが、Ph^1陽性ALLではMーbcrとmーbcr領域に切断点を持つものがおよそ半数ずつ存在した。またCML急性転化例5例のうち3例では切断点がMーbcr領域の両方に観察された。うち1例では急性期にmーbcr型の切断も出現し,治療後に消失した。以上の結果から,mーbcr型BCR/ABL遺伝子と急性転化の関連が示唆された。p53遺伝子は大腸癌などでその変異が解析されており,変異部位は500bpの範囲にわたっている。このためRTーPCR法とSSCP法を用いて変異の有無を解析した。解析の結果,50例の白血病症例中4例にp53遺伝子の変異が予想された。これらのcDNAの塩基配列を決定した結果いずれも片方のアレルの変異と他方のアレルでのp53mRNAの欠損が明らかになった。この結果から,これらの症例においては両方のアレルでp53遺伝子が不活化され,この不活化が白血病の発症に寄与している可能性が考えられた。

The ras gene is activated by a sudden change in the base point. This method is called Differential hybridization. The results showed that N-ras gene activation was detected in 13 of 90 MDS cases, and leukemia metastasis was detected in 11 of 13 MDS cases. The activation of ras gene is important for MDS leukemia. Ph^1-positive CML and Ph^1-positive ALL were analyzed by RT PCR. Ph^1 positive CML 5 cases of CML acute inflammation were observed in 3 cases of CML acute inflammation. In 1 case, m-bcr-type amputation appeared in acute stage and disappeared after treatment. These results indicate that the association between acute transformation and BCR/ABL gene mutation is very important. The p53 gene was analyzed for colorectal cancer, and the 500bp DNA fragment was analyzed for colorectal cancer. PCR and SSCP methods are used to analyze differences. The results showed that p53 gene was detected in 4 out of 50 leukemia patients. The gene sequence of p53mRNA was determined by PCR. The results showed that the p53 gene was not activated in all cases, and the possibility of its inactivation was examined.

项目成果

Sugimoto,K.et al.: "Mutations of the p53 gene in lymphoid leukemia." Blood.

Sugimoto,K.et al.：“淋巴白血病中 p53 基因的突变。”

平井 久丸ほか: "分子血液学" 丸善出版社, 275 (1990)

平井久丸等：《分子血液学》丸善出版社，275（1990）

Maru,Y.et al.: "Human 1tk:Gene structure and preferential expression in human leukenic cells." Oncogene Res.5. 199-204 (1990)

Maru,Y.et al.：“人类 1tk：人类白血病细胞中的基因结构和优先表达。”

Hirai,H.et al.: "Siteーdirected mutagenesis of the SH2ーand SH3ーcoding domains of cーsrc prodces varied phenotypes,including oncogenic activation of p60^<cーsrc>." Mol.Cell.Biol.10. 1307-1318 (1990)

Hirai, H. 等人：“c-src 的 SH2 和 SH3 编码域的定点诱变产生了不同的表型，包括 p60^<c-src> 的致癌激活。” .1307-1318 (1990)

Hirai,H.et al.: "Mutations in src homology regions 2 and 3 of activated chicken cーsrc that result in preferential transformation of mouse or chicken cells." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 87. 8592-8596 (1990)

Hirai, H. 等人：“激活的鸡 cーsrc 的 src 同源区 2 和 3 中的突变导致小鼠或鸡细胞的优先转化。”Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87. 8592-8596。 (1990)