IL-2受容体γc鎖トランスジェニックマウスの作製とその解析

IL-2受体γc链转基因小鼠的产生和分析

• 批准号: 11148206
• 负责人: 藤井 穂高
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11148206/
• 关键词: インターロイキン2; 免疫不全症; Jak3蛋白チロシンキナーゼ; T細胞; Bc1-2蛋白

本研究では、インターロイキン2受容体(IL-2R),IL-4R,IL-7R,IL-9R,IL-15Rの共通サブユニットで、伴性重症複合免疫不全症の原因遺伝子であるIL-2Rγcの構造機能相関を、培養細胞系とトランスジェニックマウスの系を用いて解析した。1.IL-2Rγcから伝達されるJak3非依存性シグナルの同定IL-2Rγcの細胞内ドメインはJak3蛋白チロシンキナーゼの結合に必須であるC末端領域と膜近傍領域の二つの領域から構成されている。本研究では、膜近傍領域からも、Jak3の活性化を介さないシグナルが伝達されることを明らかにした。2.1L-2Rγcトランスジェニックマウスの作製とその解析リンパ球特異的プロモーターを用いて(1)野生型、(2)細胞内ドメイン全体を欠失させた変異体、そして(3)細胞内ドメインのうち膜近傍領域を保持するがC末端のJak3結合領域を欠失させた変異体、のそれぞれをIL-2Rγc欠損マウスに発現させ、トランスジーンによるIL-2Rγc再構成マウスを作製した。IL-2Rγc欠損マウスで認められる免疫不全状態は、野生型IL-2Rγcの発現によりほぼ完全に回復した。一方、細胞内ドメイン全体を欠失する変異体を発現させても、免疫不全状態の回復は認められなかった。それに対して、膜近傍領域のみを保持する変異体の発現により、T細胞の分化が顕著に回復し、かつT細胞の分化に重要であることが示唆されているBc1-2蛋白の発現も顕著に回復した。このことから、IL-2Rγc細胞内ドメインの膜近傍領域は、T細胞分化においてBc1-2の発現を誘導するシグナルを伝達することにより、T細胞分化を誘導していることが示唆された。しかし、このマウスにおけるT細胞機能の回復は認められず、Jak3結合領域は、T細胞の機能の発現において重要な役割を果たしていることが示された。

In this study, IL-2 receptor (IL-2R),IL-4R,IL-7R,IL-9R,IL-15R were used to analyze the structural and functional correlation between IL-2R γc and the causes of sex-linked severe multiple immunodeficiency syndrome. 1. IL-2Rγc is a protein that is independent of Jak3 and is identical to IL-2Rγc. The intracellular structure of IL-2Rγc is dependent on Jak3 protein. In this study, the activation of Jak3 in the near field of membrane was investigated. 2.1 L-2Rγc receptor is characterized by its ability to function and resolve sphere-specific mutations (1) wild-type,(2) lack of all intracellular mutations,(3) lack of C-terminal Jak 3 binding domain,(4) lack of intracellular mutation,(5) lack of C-terminal Jak3 binding domain, and (6) lack of IL-2Rγc mutation. IL-2Rγc was reconstructed from IL-2Rγc. IL-2R γc deficiency is recognized as a complete response to immune deficiency, and wild-type IL-2R γc is detected as a complete response. A party, the whole cell is lost, the foreign body appears, the immune deficiency state returns to the recognition, the immune deficiency state returns to the recognition, the immune deficiency state returns to the recognition. The expression of Bc1 -2 protein in T cell differentiation and recovery is important for T cell differentiation. The expression of Bc1 -2 in IL-2R γc cells was induced in the membrane-proximal domain of IL-2R γc cells. The recovery of T cell function in Jak3 binding domain is important for the development of T cell function.

项目成果

Tsujino, S.: "Critical role of the membrane-proximal, proline-rich motif of the interleukin-2 receptor γc chain in the Jak3-independent signal transduction"Genes to Cells. 4. 363-373 (1999)

Tsujino, S.：“白细胞介素 2 受体 γc 链的近膜、富含脯氨酸基序在 Jak3 独立信号转导中的关键作用”《基因与细胞》，4. 363-373 (1999)。

Takaoka, A.: "Protein tyrosine kinase Pyk2 mediates the Jak-dependent activation of MAPK and Stat1 in IFN-γ, but not IFN-α, signaling"EMBO Journal. 18. 2480-2488 (1999)

Takaoka, A.：“蛋白酪氨酸激酶 Pyk2 介导 IFN-γ 中 MAPK 和 Stat1 的 Jak 依赖性激活，但不是 IFN-α，信号传导”EMBO 杂志 18. 2480-2488 (1999)。