CD4陰性HeLa細胞へのHIV-1感染

CD4 阴性 HeLa 细胞的 HIV-1 感染

• 批准号: 11161221
• 负责人: 原田 信志
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11161221/
• 关键词: HIV-1; エイズ; レセプター; ポリ-L-リジン; CD4; ケモカイン; ウイルス吸着; ウイルス侵入

HeLa細胞をクローニングし、HIV-1にまったく感染しないCD4陰性のN7HeLa細胞を得た。HIV-1の感染にはCD4とケモカインレセプターであるCXCR4あるいはCCR5が必要とされる。このHIV-1の複雑な初期感染様式を理解するため、CD4のないN7HeLa細胞にウイルス感染を試み、逆説的にHIV-1の細胞への吸着・侵入機構を解析した。まずポリ-L-リジン(PLL)がCD4陽性のHeLa細胞であるMAGI細胞でHIV-1の感染を最も増強することを確認した。PLLでコートされた培養プレートにHIV-1を処理(室温1時間)しN7HeLa細胞を培養すると、このCD4陰性細胞に(効率は悪いが)HIV-1を感染させることができた。ウイルスを0.025あるいは0.05%の低濃度のトリプシンで処理すると、PLLを使用したN7HeLa細胞への感染効率は上昇した。また、低pH、TPAあるいはMT-4細胞培養上清を作用させると、同様にこの感染効率を上げることができた。CD4陰性のN7HeLa細胞への感染には、PLLによるウイルス粒子と細胞膜との附着強化とHIV-1エンベロープ糖蛋白の開裂が必要であった。さらに細胞側の何らかの活性化がこの人工的感染系での感染効率を上げるのに重要であると思われた。

HeLa cells を, ロ, ロ, ニ, グ, グ, HIV-1にまったく infection of <s:1>, な, な, CD4-negative <s:1> N7HeLa cells を た. HIV-1 stous infection に とケモカ CD4とケモカ とケモカ <s:1> レセプタ である であるCXCR4ある とされる CCR5が necessary とされる. こ の の after HIV - 1 雑 な を understand others in early infection type す る た め, CD4 の な い N7HeLa cells に ウ イ ル を try み ス infection, inverse said の に HIV - 1 cell へ の sorption, invade the agency を parsing し た. ま ず ポ リ - L - リ ジ ン (PLL) が CD4 positive の HeLa で あ る tells cells で の infected with HIV - 1 を most も raised strong す る こ と を confirm し た. PLL で コ ー ト さ れ た cultivate プ レ ー ト に HIV - 1 を 処 principle (1 time) at room temperature し N7HeLa cell を culture す る と, こ の に CD4 negative cells (working rate は 悪 い が) を infected with HIV - 1 さ せ る こ と が で き た. ウ イ ル ス を 0.025 あ る い は の low concentration 0.05% の ト リ プ シ ン で 処 Richard す る と, PLL を use し た N7HeLa cells へ の rising infection rate of unseen は し た. ま た, low pH, TPA あ る い は MT - 4 cell culture supernatant を role さ せ る と, with others in に こ の on the infection rate of unseen を げ る こ と が で き た. CD4 negative の N7HeLa cells へ の infection に は, PLL に よ る ウ イ ル ス particle と membrane と の attached improved と HIV - 1 エ ン ベ ロ ー プ glycoprotein の cracking が necessary で あ っ た. さ ら に cells what side の ら か の activeness が こ の artificial infection department で の on the infection rate of unseen を げ る の に important で あ る と think わ れ た.

项目成果

Harada, S. and Maeda, Y.: "Chemically Induced Infection of CD4-Negative HeLa Cells with HIV-1"Microbiol. Immunol.. 43. 1077-1086 (1999)

Harada, S. 和 Maeda, Y.：“HIV-1 化学诱导 CD4 阴性 HeLa 细胞感染”微生物学。

Morizono, K. and Harada, S.: "Human Immunodeficiency Virus Type 2 (HIV-1) Infection and Transcytosis Activity of a HIV-1 Susceptible Clone from HeLa Cell"Mucrobiol. Immunol.. 42. 313-320 (1998)

Morizo​​no, K. 和 Harada, S.：“来自 HeLa 细胞的 HIV-1 易感克隆的人类免疫缺陷病毒 2 型 (HIV-1) 感染和转胞吞活性”Mucrobiol。