ねじれ変異株を用いた細胞伸長制御機構の解明

使用扭曲突变体阐明细胞伸长控制机制

• 批准号: 11163218
• 负责人: 橋本 隆
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Nara Institute of Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11163218/
• 关键词: アラビドプシス; 細胞伸長; ねじれ; 表層微小管; チューブリン

胚軸や根の表皮細胞層が右回りにねじれるアラビドプシスのねじれ変異株(特にspiral1)を用いて、表層微小管の配向制御の分子機構を解析している。根の伸長領域の表皮細胞の表層微小管の配向は根のねじれ方向を説明できるようなヘリックスの巻き方向であった。SPR1タンパク質は野生株のミクロソーム画分に検出され、可溶性画分には検出されなかった。SPR1を強制発現させた植物体ではミクロソーム画分と可溶性画分の両方に多量のSPR1が検出された。Yeast two-hybrid systemによりクローニングされた新規タンパク質(SPI)及びSPIにGFPを結合させたタンパク質を強制発現させた形質転換体を得ようと試みたが、得られた系統では全てco-suppressionによりSPIとその相同遺伝子の両方の発現が抑制されていた。タマネギ表皮細胞、アラビドプシス胚軸表皮細胞、アラビドプシスプロトプラストにおいてSPI-GFPを一過的に発現させると、細胞表層、細胞質で繊維状、核内などに局在が認められた。Spr1-1を突然変異剤で処理したM2種子から選抜した根と胚軸のねじれを抑制したりねじれ方向を逆転させるような変異株(ssp)の中で、spr1-1変異の有無に係わらず根と葉柄の表皮細胞が左巻きにねじれている変異株lefty(lft)の解析を進めた。Lft1およびlft2には野生型backgroundで劣性、spr1backgroundで半優性である。Lft1をfine mappingしたところ、該当領域のα-tuculin6遺伝子にミスセンス変異を見だした。

The molecular mechanism of the alignment control of the microtubules in the surface layer of the hypocotyl was analyzed. The orientation of epidermal cells in the root elongation domain is explained in the direction of root elongation. SPR1 is a wild strain that can be isolated from soluble species. SPR1 stress is detected in plants, and a large amount of SPR1 is detected in the soluble fraction and soluble fraction. Yeast two-hybrid system is composed of SPI and GFP, which are combined with SPI to induce the formation of SPI and GFP. The system is composed of SPI and GFP to inhibit the formation of SPI and SPI. SPI-GFP was found in epidermal cells, embryonic epidermal cells, embryonic epidermal cells, epidermal cells, cytoplasmic cells, and nuclear cells. Spr1 -1 was changed suddenly and the analysis of M2 seed, root and hypocotyl cells, lefty(lft) was carried out. Lft1 lft2 wild-type background inferior, spr1 background semi-superior Lft1 fine mapping, α-tuculin6 in this domain

项目成果

K.Ueda et al: "Visualization of microtubules in living cells of transgenic Arabidopsis thaliana"Protoplasma. 206. 201-206 (1999)

K.Ueda 等人：“转基因拟南芥活细胞中微管的可视化”原生质体。