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形態の多様性を生み出す分子機構の解析

产生形态多样性的分子机制分析

基本信息

批准号：
13045021
负责人：
佐々木洋
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2001
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13045021/
关键词：
マウス Foxa2 ノード脊索エンハンサー

项目摘要

本研究では、形態の多様性を生み出す分子的基盤を明らかにすることを目的とし、本年度は、その最初の段階としてマウス胚のノードの形成機構の解析を行った。まず、ノードの形成に必須な転写因子Foxa2(HNF3β)に注目し、その遺伝子発現制御機構を明らかにするため、そのノード・脊索特異的エンハンサーを同定した。さらにニワトリとドワーフグーラミー(ゲノムサイズの小さい魚類の一種)とでFoxa2をクローニングし、それらについてもトランスジェニックマウスを作成することにより、マウスのノード・脊索で遺伝子発現を与えるエンハンサーを同定した。これら3種のノードエンハンサーの塩基配列の比較により、共通に存在する配列を同定し、その中で、CS3という新規の配列がエンハンサー活性に必須であることを見いだした。このことから、CS3に結合する未知の転写因子がノード・脊索の形成に中心的な働きをしていることが示唆された。そこでつぎに、CS3に結合する転写因子を同定するために、酵母one-hybrid法によりマウス胚cDNAライブラリーをスクリーニングし、2種類の転写因子がCS3に特異的に結合することを見いだした。そのうちの一方は、胚全体で広く発現しているが、それを転写活性化型に改変してゼブラフィッシュ胚で過剰発現させるとFoxa2の異所的な発現が誘導されることから、それがCS3活性化因子の良い候補と考えられた。よって、この広く発現している転写因子が、局所的に活性化されることによりFoxa2の発現を誘導しノードが形成されるという機構が考えられる。

This study is aimed at analyzing the molecular basis for morphological diversity and the initial stages of molecular development. The factor Foxa2 (HNF3 β) is required for the formation of the gene, and the gene generation control mechanism is also determined. In addition, Foxa2 can also be used as a tool to detect and detect the presence of a small fish. The three kinds of base arrangement are compared, the common arrangement is the same, the CS3 is the new arrangement is the same, and the activity is the same. This is the case with CS3, which is an unknown factor in the formation of the central chord. CS3 binding factors are determined by yeast one-hybrid method. CS3 binding factors are determined by yeast one-hybrid method. CS3 binding factors are determined by yeast one-hybrid method. On the one hand, the whole body of the virus has been widely discovered, and the activation type has been modified without any changes. However, the discovery of Foxa2's unique features has been induced. This makes it a good candidate for the CS3 activation factor. In addition, Foxa 2 is also an important component of Foxa 2. Foxa2 is an important component of Foxa 2.