权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

転写因子の機能に注目した脊椎動物のオーガナイザー・脊索形成機構の解析

以转录因子功能为重点的脊椎动物组织者/脊索形成机制分析

基本信息

批准号：
10173220
负责人：
佐々木洋
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

脊椎動物の体軸構造の形成過程では、オーガナイザー及びそれに由来する脊索などの体軸中央の組織が重要な働きをしており、その形成機構を解明することが、体軸形成機構を理解する上で重要な鍵となっている。そこで私は、マウス胚のオーガナイザー・脊索の形成に必須の転写因子であるHNF-3βに注目し、その遺伝子発現制御機構を明らかにするため、トランスジェニックマウス胚を用いてエンハンサーの解析をしてきた。本研究では、このエンハンサー活性に重要な塩基配列を同定する事を目的として、異なる種間でのエンハンサーの塩基配列の比較を行った。魚類(ドワーフグーラミー)およびニワトリからHNF-3βをクローニングし、トランスジェニックマウス胚を作成して、オーガナイザー・脊索のエンハンサーを同定した。塩基配列の比較によりマウス・トリ・魚の3つの種間で保存された3つの配列(CS1,CS2,CS3)を見いだした。CS1,CS2はそれらを欠失すると遺伝子発現の強さが著しく減少したが、発現の組織特異性は保たれていた。一方CS3を欠失すると、ノード・脊索での遺伝子発現は完全に失われ、異所的な発現のみが見られた。したがってエンハンサーは、CS3の関与する領域特異性を決定する部位と、CSl/2の関与する遺伝子発現レベルを増強する部位とから成り立っている事が示唆された。ニワトリ胚の核抽出液を用いたin vitroでのDNA結合実験によりCS3に結合する因子の存在を確認でき、さらに、CS3内に塩基置換を導入した実験から、その因子の結合活性とエンハンサー活性とが対応する事も分かった。したがって、この因子がオーガナイザー特異的な遺伝子発現の制御に重要な役割をしていると考えられ、今後、その因子を同定し、その機能を解析することにより、オーガナイザー形成の分子機構の一端を明らかにする事が出来ると期待される。

The formation process of the body axis structure of vertebrates. The origin of the structure of the body axis of vertebrates. The origin of the notochord and the importance of the central organization of the body axis.な卍きをしており, その forming mechanism を Explain することが, Body axis forming mechanism を Understanding する上でimportant なKey となっている.そこでprivateは、マウスEmbryoのオーガナイザー・Notochord の Formation にRequired の転WRITING FACTOR であるHNF-3βにAttentionし、その legacy The current control mechanism of 伝子発を明らかにするため、トランスジェニいてエンハンサーのanalytic をしてきた. In this study, it is important to determine whether the activity of the active ingredient is the same as the base arrangement. Purpose: Comparison between different species and different species. Fish(ドワーフグーラミー)およびニワトリからHNF-3βをクローニングし, ToroンスジェニクマウスEmbryo made of して, オーガナイザー・Chord of のエンハンサーを同定した. Comparison of the base arrangement of the によりマウス・トリ・鱼の3つの interspecific preservation of the された3つのalignment (CS1, CS2, CS3) を见いだした. CS1 and CS2 are the same as the ones that are missing and the ones that are missing are the ones that are strong and strong, and the tissue specificity is the same and the tissue specificity is the same. CS3 on one side has a missing character, a missing character, a missing character, and a different character.したがってエンハンサーは、CS3's relationship and するField specificity をDetermined するPartと、CSl/ 2の关与する remain 伝子発 appear レベルを Increase and strengthen the する parts and とから成り立っている事が说 instigating された. Nuclear embryonic nucleus extract liquid is used in In vitroでのDNA binding 実験によりCS3にbindingするfactor's existenceのconfirmationでき、さらに、CS3内にThe substitution of the hydroxyl group is the introduction of the binding activity of the factor and the binding activity of the factor.したがって, このfactor がオーガナイザーSpecial な缝子発 appearsのcontrolにimportantな个 Cutをしていると考えられ、from now on、そのfactorをThe molecular structure of the molecular mechanism formed by the same function, analysis of the functions, and the analysis of the functions are revealed and expected.