Der Austausch von Nucleobasen durch Fluorophorsysteme. Parallele Synthese und biophysikalische Untersuchung intern fluoreszenzmarkierter Peptidnucleinsäuren

通过荧光团系统进行核碱基交换。

基本信息

批准号：
5299942
负责人：
Professor Dr. Oliver Seitz
金额：
--
依托单位：
Institut für Chemie
依托单位国家：
德国
项目类别：
Research Grants
财政年份：
2000
资助国家：
德国
起止时间：
1999-12-31 至 2002-12-31
项目状态：
已结题

来源：
https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5299942?language=en
关键词：
Der Austausch von Nucleobasen durch

项目摘要

Die Bindung zweier komplementärer Nucleinsäuren ist die Grundlage vieler molekularbiologischer Verfahren. Zur DNA-Detektion sollen DNA-Analoga synthetisiert werden, bei denen ein Intercalatorfarbstoff als "Basensurrogat" eine natürliche Nucleobase ersetzt. Als molekulares Gerüst werden Peptidnucleinsäuren verwendet, die mit extrem hoher Affinität Ziel-DNA binden. Eine rasche und parallele Synthese der intern markierten PNA-Fluorophor-Konjugate wird ermöglicht, in dem alle Schritte inklusive der Synthese der "Fluorophor-Monomere" an der festen Phase erfolgen. Nach Bindung an DNA ist der Fluorophor im Inneren eines PNA-DNA-Duplex positioniert und reagiert auf Strukturänderungen in seiner Umgebung. Die Hybridisierung mit einem komplementären DNA-Strang führt zu einer Intensivierung der Interkalatorfluoreszenz. Hingegen wird bei der erzwungenen Interkalation neben fehlgepaarten Basen eine Erniedrigung der Fluoreszenzintensität erwartet. Molekülrotationen um die PNA-FluorophorBindung werden die Fluoreszenzanisotropie im Vergleich zu perfekt komplementären Duplices erniedrigen. Diese Techniken sollten eine einfache Detektion von Einzelbasen-Polymorphismen (SNP's) ermöglichen. Deren Aufspürung ist für das grundlegende Verständnis der Erbkrankheiten von zentraler Bedeutung.

Die bindung Zweierkoumplementärer核素iSt Die Grundlage Vieler Molekularbiologischer Verfahren。 zur dna-detektion sollen dna-analoga synthetisiert werden，bei denen ein ein Intercalatorfarbstoff als“ basensurogat” einenatürlliche核酶ersetzt。 Als MolekularesGerüstWerdenpherdennucleinsäurenVerwendet，Die Mit Extrem HoherAffinitätZiel-Dna Binden。 Eine rasche und Parallele synthese der pNA-fNA-luorophor-konjugate野生ermöglicht，除了所有schriglicht中，除了合成的“荧光谱”期Erfolgen之外。 pNA-DNA-DUPLEX位置更及塞纳Umgebung中的Reagiert Auf Aufstrukturänderung。 Hybridisierung Mit MitKomplementärenDNA-strung Zu Zu Einer Intensivierung Interkalatorfluoreszenz。 hingegen wird bei der erzwungenen互互合作neben fehlgepaarten base base eine erniedrigung derfluoreszenzentensitäterwartet。 molekülrotationenum die pna-fluorophorbindung werden die fluoreszenzanisotropie im vergleich Zu Zu perfectektkoussementären重复ERNIEDRIGEN。 Diese Techniken Sollten Eine Einefache Detektion von Einzelbasen-Polymormormormormorpormentemen（SNP's）Ermöglichen。 Deren theAufspürung是最好的去处，整个家庭都是最好的。