Der Austausch von Nucleobasen durch Fluorophorsysteme. Parallele Synthese und biophysikalische Untersuchung intern fluoreszenzmarkierter Peptidnucleinsäuren

通过荧光团系统进行核碱基交换。

• 批准号: 5299942
• 负责人: Professor Dr. Oliver Seitz
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Chemie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1999-12-31 至 2002-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5299942?language=en
• 关键词: Der; Austausch; von; Nucleobasen; durch

Die Bindung zweier komplementärer Nucleinsäuren ist die Grundlage vieler molekularbiologischer Verfahren. Zur DNA-Detektion sollen DNA-Analoga synthetisiert werden, bei denen ein Intercalatorfarbstoff als "Basensurrogat" eine natürliche Nucleobase ersetzt. Als molekulares Gerüst werden Peptidnucleinsäuren verwendet, die mit extrem hoher Affinität Ziel-DNA binden. Eine rasche und parallele Synthese der intern markierten PNA-Fluorophor-Konjugate wird ermöglicht, in dem alle Schritte inklusive der Synthese der "Fluorophor-Monomere" an der festen Phase erfolgen. Nach Bindung an DNA ist der Fluorophor im Inneren eines PNA-DNA-Duplex positioniert und reagiert auf Strukturänderungen in seiner Umgebung. Die Hybridisierung mit einem komplementären DNA-Strang führt zu einer Intensivierung der Interkalatorfluoreszenz. Hingegen wird bei der erzwungenen Interkalation neben fehlgepaarten Basen eine Erniedrigung der Fluoreszenzintensität erwartet. Molekülrotationen um die PNA-FluorophorBindung werden die Fluoreszenzanisotropie im Vergleich zu perfekt komplementären Duplices erniedrigen. Diese Techniken sollten eine einfache Detektion von Einzelbasen-Polymorphismen (SNP's) ermöglichen. Deren Aufspürung ist für das grundlegende Verständnis der Erbkrankheiten von zentraler Bedeutung.

结合两种补充的核蛋白是基础分子生物学的一部分。DNA检测需要DNA类似物合成韦尔登，因为插入物是天然核碱基的“替代物”。所有的分子都可以韦尔登核结合，它们具有极高的亲和力和DNA结合。本文介绍了一种新的标记PNA-荧光体-偶联物的平行合成方法，即荧光体-单体的合成和固定相的合成。DNA结合后，荧光团在PNA-DNA-Duplex内定位并在结构上反应。Die Hybridisierung mit einem komplementären DNA-Strang führt zu einer Intensivierung der Interkalatorfluoresenz. Hingegen wird bei der erzwungenen Interkalation neben fehlgepaarten Basen eine Erniedrigung der Erzenzintensität erwartet.分子旋转使PNA-荧光素结合韦尔登在Vergleich中产生各向异性，从而使双拷贝更加完美。该技术解决了一个单核苷酸多态性（SNP）的检测问题。Deren Aufspürung ist für das grundesterion de Verständnis der Erbkrankheiten von zentraler Bedeutung.