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Der Austausch von Nucleobasen durch Fluorophorsysteme. Parallele Synthese und biophysikalische Untersuchung intern fluoreszenzmarkierter Peptidnucleinsäuren

通过荧光团系统进行核碱基交换。

基本信息

批准号：
5299942
负责人：
Professor Dr. Oliver Seitz
金额：
--
依托单位：
Institut für Chemie
依托单位国家：
德国
项目类别：
Research Grants
财政年份：
2000
资助国家：
德国
起止时间：
1999-12-31 至 2002-12-31
项目状态：
已结题

来源：
https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5299942?language=en
关键词：
Der Austausch von Nucleobasen durch

项目摘要

Die Bindung zweier komplementärer Nucleinsäuren ist die Grundlage vieler molekularbiologischer Verfahren. Zur DNA-Detektion sollen DNA-Analoga synthetisiert werden, bei denen ein Intercalatorfarbstoff als "Basensurrogat" eine natürliche Nucleobase ersetzt. Als molekulares Gerüst werden Peptidnucleinsäuren verwendet, die mit extrem hoher Affinität Ziel-DNA binden. Eine rasche und parallele Synthese der intern markierten PNA-Fluorophor-Konjugate wird ermöglicht, in dem alle Schritte inklusive der Synthese der "Fluorophor-Monomere" an der festen Phase erfolgen. Nach Bindung an DNA ist der Fluorophor im Inneren eines PNA-DNA-Duplex positioniert und reagiert auf Strukturänderungen in seiner Umgebung. Die Hybridisierung mit einem komplementären DNA-Strang führt zu einer Intensivierung der Interkalatorfluoreszenz. Hingegen wird bei der erzwungenen Interkalation neben fehlgepaarten Basen eine Erniedrigung der Fluoreszenzintensität erwartet. Molekülrotationen um die PNA-FluorophorBindung werden die Fluoreszenzanisotropie im Vergleich zu perfekt komplementären Duplices erniedrigen. Diese Techniken sollten eine einfache Detektion von Einzelbasen-Polymorphismen (SNP's) ermöglichen. Deren Aufspürung ist für das grundlegende Verständnis der Erbkrankheiten von zentraler Bedeutung.

Die Bindung zweier komplementärer Nucleinsäuren ist Die Grundlage viler分子生物学家Verfahren。Zur dna - detection sollen DNA-Analoga synthetic titisiert werden, bedenen in Intercalatorfarbstoff，“bassurerogat”，natrliche Nucleobase ersett。所有分子都是ger<s:1> st werden Peptidnucleinsäuren verwendet, die mit extreme hoterAffinität zel - dna binding。合成内部标记物PNA-Fluorophor-Konjugate， ermöglicht， in dem alle Schritte包含合成“Fluorophor-Monomere”和festen相erfolgen。Nach结合和DNA链的荧光分子内链，pna -DNA-双工定位和重组的研究Strukturänderungen在海南海南。Die Hybridisierung mit einem komplementären DNA-Strang fhrt zu einer Intensivierung der Interkalatorfluoreszenz。Hingegen wind在derzwungenen Interkalation中被称为derzwungenen Interkalation，在derzwungenen Interkalation中被称为derzwungenen Interkalation。分子<s:1>旋转体- PNA-FluorophorBindung - werden - die荧光各向同性im Vergleich zu perfect komplementären双体驱动。基因多态性检测（SNP） ermöglichen。Deren aufsprrung ist fr das grundlegende Verständnis der Erbkrankheiten von zentraler Bedeutung。