Selbstreinigende Synthese von Peptidthioestern zum Aufbau von Proteindomänen auf Arrays und auf Beads

Die festphasen合成von peptidthiosterstergelingt gegenwärtig night mit den selben Ausbeuten und Reinheiten wie f<s:1> r Peptidsäuren und -amide gewohnt。Aus diesem Grund wurde bislang bei der chemischen全合成Proteindomänen-Arrays， die ber native chemische Ligation hergestellt werden, lediglich der C-terminale Teil variiert, während die Sequenz des N-terminalen Fragments (thiioester) beibehalten werden musste。In den Vorarbeiten wurde eine leistungsfähige method zur vollautomatischen synthesis on peptidthiosteretliert, die under Ausnutzung eines“selbstreinigungseeffts”rohproduckte hoher Reinheit liefert。Diese können直接研究了HPLC-Reinigung在天然化学结扎中的应用。Die peptide thiioester werden Die chemische syntheseines SH3-Domänen-Arrays ermöglichen。Der Array研究进展与进展，研究方向：SH3-Domänen des Hefeproteoms präsentieren。Durch die Entwicklung eines半胱氨酸-扫描和beispielhaft untersut，和welchen stelen das <s:1>本地化学结扎benötigte半胱氨酸eingefgt werden kann， ohne dass Kupplungsausbeuten和die Funktion der Proteindomäne leiden。Geträgerte肽硫酯的研究进展。Hier wind die Ablösung vom Syntheseharz reine Proteindomänen liefern, da lediglich das verkn<e:1> pfungsprodukt and der Festphase gebildet wind, während Nebenprodukte and Abbruchsequenzen in Lösung verbleiben。

Die Festphasensynthese von Peptidthioestern gelingt gegenwärtig nicht mit den selben Ausbeuten und Reinheiten wie für Peptidsäuren und -amide gewohnt. Aus diesem Grund wurde bislang bei der chemischen Totalsynthese von Proteindomänen-Arrays, die über native chemische Ligation hergestellt werden, lediglich der C-terminale Teil variiert, während die Sequenz des N-terminalen Fragments (Thioester) beibehalten werden musste. In den Vorarbeiten wurde eine leistungsfähige Methode zur vollautomatischen Synthese von Peptidthioestern etabliert, die unter Ausnutzung eines „Selbstreinigungseffekts" Rohprodukte hoher Reinheit liefert. Diese können direkt ohne HPLC-Reinigung in der nativen chemischen Ligation eingesetzt werden. Die Peptidthioester werden die chemische Synthese eines SH3-Domänen-Arrays ermöglichen. Der Array wird zwei verschiedene, wohlcharakterisierte SH3-Domänen des Hefeproteoms präsentieren. Durch die Entwicklung eines Cystein-Scans wird beispielhaft untersucht, an welchen Stellen das für die native chemische Ligation benötigte Cystein eingefügt werden kann, ohne dass Kupplungsausbeuten und die Funktion der Proteindomäne leiden. Geträgerte Peptidthioester werden in einer On Bead Ligation verwendet. Hier wird die Ablösung vom Syntheseharz reine Proteindomänen liefern, da lediglich das Verknüpfungsprodukt an der Festphase gebildet wird, während Nebenprodukte und Abbruchsequenzen in Lösung verbleiben.