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Selbstreinigende Synthese von Peptidthioestern zum Aufbau von Proteindomänen auf Arrays und auf Beads

用于在阵列和珠子上构建蛋白质结构域的肽硫酯的自清洁合成

基本信息

批准号：
21521648
负责人：
Professor Dr. Oliver Seitz
金额：
--
依托单位：
Institut für Chemie
依托单位国家：
德国
项目类别：
Research Grants
财政年份：
2005
资助国家：
德国
起止时间：
2004-12-31 至 2012-12-31
项目状态：
已结题

来源：
https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/21521648?language=en
关键词：
Selbstreinigende Synthese von Peptidthioestern zum

项目摘要

Die Festphasensynthese von Peptidthioestern gelingt gegenwärtig nicht mit den selben Ausbeuten und Reinheiten wie für Peptidsäuren und -amide gewohnt. Aus diesem Grund wurde bislang bei der chemischen Totalsynthese von Proteindomänen-Arrays, die über native chemische Ligation hergestellt werden, lediglich der C-terminale Teil variiert, während die Sequenz des N-terminalen Fragments (Thioester) beibehalten werden musste. In den Vorarbeiten wurde eine leistungsfähige Methode zur vollautomatischen Synthese von Peptidthioestern etabliert, die unter Ausnutzung eines „Selbstreinigungseffekts" Rohprodukte hoher Reinheit liefert. Diese können direkt ohne HPLC-Reinigung in der nativen chemischen Ligation eingesetzt werden. Die Peptidthioester werden die chemische Synthese eines SH3-Domänen-Arrays ermöglichen. Der Array wird zwei verschiedene, wohlcharakterisierte SH3-Domänen des Hefeproteoms präsentieren. Durch die Entwicklung eines Cystein-Scans wird beispielhaft untersucht, an welchen Stellen das für die native chemische Ligation benötigte Cystein eingefügt werden kann, ohne dass Kupplungsausbeuten und die Funktion der Proteindomäne leiden. Geträgerte Peptidthioester werden in einer On Bead Ligation verwendet. Hier wird die Ablösung vom Syntheseharz reine Proteindomänen liefern, da lediglich das Verknüpfungsprodukt an der Festphase gebildet wird, während Nebenprodukte und Abbruchsequenzen in Lösung verbleiben.

这个节日的目的是把这些多肽硫酯胶凝成胶体，然后再把这些多肽胶凝成胶体。这些von Proteindonänen阵列，是天然的化学连接遗传基因，是C-末端变异的产物，是由N-末端片段(硫酯)组成的序列。在这本书中，所有的东西都是用自动合成的方法合成的，这些东西都是在澳大利亚的“Selbstreinigungseffekts”Rohprodukte Hoher Reinheit liefert下完成的。用高效液相色谱(HPLC法)测定了化学配基的含量。多肽硫酸酯是由化学合成的SH3-Domänen-Arrades Ermöglichen。Der阵列将使用zwei verschiedene，whlcharakterisierte SH3-Domänen des Hefeproom Präsentieren。这是一种本土化的化学连接方式，也是一种本土化的连接方式，也就是说，它的功能来自于莱顿的投资。Geträgerte多肽硫酯在珠子结扎的网眼中。在此，我们将在L的遗迹中合成新的遗迹和遗迹，以及新的遗迹和遗迹。