カルポニン欠損マウスを用いた血管肥厚モデルの解析

钙调蛋白缺陷小鼠血管肥大模型分析

• 批准号: 11877016
• 负责人: 尾崎 博
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877016/
• 关键词: カルポニン; 器官培養; 平滑筋; ノックアウト; ラッチ機構; 内皮

本研究は、血管の器官培養法を用いて、PDGFによって誘導される血管組織の形態および機能変化を、h1-カルポニン(CP)欠損マウスと正常マウスの血管とで比較検討することにより、増殖性血管病変でのカルポニンの病態生理的役割を明らかにすることを目的としたものである。初年度は基礎的な知見として、血管ならびに他の平滑筋の収縮性におけるカルポニンの意義についての解析を行ったが、研究は望外の発展を見せ、カルポニンが平滑筋収縮機構におけるラッチ機構をになう蛋白質であることを発見できた。概要は以下の通りである。野生型マウス(+/+)及びh1カルポニン遺伝子欠損マウス(-/-)由来の大動脈をKClで刺激すると、同程度の収縮張力が発生した。刺激後初期及び、後期でそれらのクロスブリッジの活性を検討すると、+/+は後期でその活性が低下しラッチ状態を示したが、-/-は後期になってもクロスブリッジの活性は高いままであった。なお、KClによる細胞内Ca^<2+>濃度、ミオシンリン酸化量の変化には両者で違いは認められなかった。また、輸精管平滑筋をKClで刺激すると細胞内Ca^<2+>濃度、リン酸化ミオシン量とも両者で同程度に上昇したが、最大筋短縮速度が-/-で有意に上昇していた。以上の成績から、h1カルポニンがミオシンのアクチンからの解離を抑制することによって平滑筋収縮安定期のクロスブリッジ活性を低レベルに押さえていることが示唆され、ラッチ機構を担う蛋白質であることが証明された。カルポニン欠損の血管を用いて、器官培養法によりPDGFや胎仔血清の作用を見るという研究には至らなかったが、その前段階の基礎的研究として、ウサギ腸間膜動脈およびラット尾動脈を用いた研究を公表できた(論文リスト参照)。

In this study, the morphological and functional changes of vascular tissue induced by PDGF in vascular organ culture were compared with those of normal vascular tissue. In the early years, the basic knowledge and significance of blood vessels and other smooth muscle contraction were analyzed and studied. The development of smooth muscle contraction mechanism and protein development were also studied. Summary of the following: Wild-type (+/+) and h1-type (-/-) strains are induced by KCl stimulation in the aorta. After stimulation, the activity in the early and late stages of stimulation decreased and the activity in the +/+ and late stages increased. The intracellular Ca^<2+> concentration, pH value and pH value of KCl were determined. The intracellular Ca^<2+> concentration, the amount of calcium chloride and the maximum contraction velocity of the tendon increased to the same extent when stimulated by KCl. The above results show that the protein content of the protein content. The study on the role of PDGF and fetal serum in the development of blood vessels, organ culture, and the use of mesenteric artery and tail artery.

项目成果

H.Nakazawa, M.Hori, H.Ozaki and H.Karaki: "Mechanisms underlying the impairment of endothelium-dependent relaxation in the p monocrotaline-induced pulmonary hypertensive rats"Br. J. Pharmacol.. 128. 1098-1104 (1999)

H.Nakazawa、M.Hori、H.Ozaki 和 H.Karaki：“野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠内皮依赖性舒张受损的机制”Br。

R.Yoshimoto ら: "Proteolysis of acidic calponin by μ-calpain"J.Biochem.. 128. 1045-1049 (2000)

R. Yoshimoto 等人：“μ-钙蛋白酶对酸性钙调蛋白的蛋白水解”J.Biochem.. 128. 1045-1049 (2000)

R.Yoshimoto ら: "Ca^<2+>-sensitization of contraction in the h1 calponin-deficient smooth muscle"Jpn.J.Pharmacol.. 128. 1045-1049 (2000)

R.Yoshimoto等人：“Ca^2+-h1钙调蛋白缺陷平滑肌收缩的敏化”Jpn.J.Pharmacol..128.1045-1049(2000)

H.Yamawaki ら: "Morphological and functional changes of rabbit mesenteric artery cultured with fetal bovine serum"Life Sciences. 67. 807-820 (2000)

H. Yamawaki 等人：“用胎牛血清培养的兔肠系膜动脉的形态和功能变化”生命科学 67. 807-820 (2000)。

H.Yamawaki, K.Sato, M.Hori ら: "Impairment of EDR by a long-term PDGF treatment in organ cultured rabbit mesenteric artery"Am. J. Physiol.. 277. H318-H323 (1999)

H. Yamawaki、K. Sato、M. Hori 等人：“器官培养兔肠系膜动脉长期 PDGF 治疗对 EDR 的损害”Am. J. Physiol.. 277. H318-H323 (1999)