ゲノム変異を積極的に獲得するメカニズムの解析

基因组突变主动获得的机制分析

• 批准号: 11877030
• 负责人: 本間 好
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Fukushima Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877030/
• 关键词: 情報伝達; ゲノム; 複製; 変異; 修復; B細胞; 抗体遺伝子

全ての細胞において、そのゲノム情報は忠実に複製され娘細胞へと継承される。しかし、ある特定の細胞では、ゲノムにもたらされた変異を積極的に取り込む現象がしばしば観察される。本研究では、このような突然変異獲得に関与する分子を同定し、その分子機構を解明することを目的とする。本年度までに、以下の研究成果を得た。1 マウスミエローマNS0細胞がB細胞株J558Lに比べ高頻度で突然変異を起こすという知見に基づき、これらの培養細胞を用いた体細胞突然変異の試験管内検出系を確立した。この検出系は、可変領域に終止コドンを導入したIgGγ2a遺伝子を強制発現した細胞株を用い、突然変異で生じるセンス置換の結果、生成・分泌されるIgを酵素抗体法で検出するというものである。2 NS0細胞とJ558L細胞から作製したcDNAライブラリー間でのサブトラクションにより、これまでに突然変異を起こすNS0細胞に特異的に発現しているcDNAを4クローンを単離した。これらのうちの一つは、DNAと相互作用すると考えられるジンクフィンガーモチーフを有する新規分子、もう一つはDNAポリメラーゼと相同性の高い新規分子であった。また残りのふたつは現在までに同定できていない。3 Two hybrid等の特異的結合蛋白質の解析から、これらの遺伝子産物は修復系と相互作用するような機能を持つことが判明した。現在さらにこれらの蛋白質の機能の解析をすすめている。

The whole cell is in the middle of the process, and the whole cell is in the middle of the process, and the whole cell is in the process of replication. In addition to the above, the specific cells have to be actively monitored. This study focuses on the molecular identity and molecular structure of different species. This year, the following research results were obtained. 1. The frequency of sudden changes in B cell line J558L is higher than that in B cell line J558L. The expression of IgGγ2a gene in the cell line was detected by enzyme antibody method, and the expression of IgGγ2a gene was detected by enzyme antibody method. 2 NS0 cells and J558L cells were found to be involved in the production of cDNA. A new molecule, a new DNA molecule.また残りのふたつは现在までに同定できていない。Analysis of specific binding proteins such as Two hybrids, identification of their repair system and interaction with each other Now we will analyze the function of these proteins.