权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

細胞表面における核酸受容とその生理的役割の解析

细胞表面核酸接收及其生理作用分析

基本信息

批准号：
14657042
负责人：
本間好
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Fukushima Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657042/
关键词：
細胞表面タンパク質アフィニティークロマトグラフィー CpGモチーフ DNA結合タンパク質ヌクレオリン細胞外DNA 核酸受容体細胞内情報伝達カラムクロマトグラフィー CK2 マススペクトロメトリー TLR9

项目摘要

核酸の受容や取り込み機構の分子基盤に関する解析は行われておらず、また、核酸の情報伝達という視野に立って研究を推進しているグループもほとんどない。本研究では、非メチル化CpGモチーフ含有DNAを固定化したアフィニティカラムを用いて、形質膜画分よりこのDNA断片に特異的に結合するタンパク質複合体を精製し、その性状や機能を解析した。その結果、次の新しい知見を得た。1)アフィニティカラムを用いて形質膜画分より精製したタンパク質をマススペクトロメトリーにて解析した結果、ヌクレオリン、カゼインキナーゼ2(CK2)αサブユニットなどが含まれることが判明した。2)各種DNAを用いた競合実験よりCpGモチーフ含有DNAに結合するのはヌクレオリンであった。3)ヌクレオリンは免疫細胞ばかりでなく、これらの複合体は上皮細胞など、非免疫細胞の細胞表面にも存在した。4)ヌクレオリンは非メチル化CpGモチーフ含有DNAをはじめ異なる核酸に結合したが、非メチル化CpGモチーフ含有DNAとの結合が最大であった。5)ヌクレオリンのC末端側のRGGドメインとDNAが相互作用した。6)Toll様受容体(TLR9)とヌクレオリンとの相互作用は観察できなかった。7)RGGドメインのみを過剰発現することにより、細胞外に添加したレポータープラスミドの核移行を阻害した。以上の結果より、細胞表面にToll様受容体以外のDNA受容機能が各種細胞に普遍的に存在し、ヌクレオリンが中心的な役割を担うこと、また、ヌクレオリンは細胞外DNAの核への細胞内輸送にも関与し、RGGドメインが細胞内輸送に対してドミナントネガティブ効果を示すことが明らかとなった。

Nucleic acid receptor system molecular matrix analysis, nucleic acid receptor system, nucleic acid receptor system, nucleic In this study, CpG containing DNA was immobilized and used to purify, characterize and analyze specific binding of DNA fragments. The results of the survey, the second time in the new knowledge to see. 1) 2)The competition between various DNAs enables CpG molecules to contain DNA and bind to it. 3) The immune cells are isolated from the epithelial cells and the non-immune cells are present on the cell surface. 4) DNA and CpG binding is the largest binding between DNA and CpG. 5) DNA interaction with RGG on the C-terminal side of the protein. 6)Toll receptor (TLR9): The interaction between Toll receptor and Toll receptor is observed. 7) RG-induced nuclear migration is inhibited by extracellular addition. As a result, DNA receptivity functions other than Toll receptors on cell surfaces are common in all kinds of cells, and central DNA binding functions are involved in intracellular DNA transport.